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《中国食品科学技术学会第十七届年会摘要集》 2020年
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猴头菌多糖合成关键基因A6180的克隆和异源表达

任鄄宝  邹根  张赫男  吴迪  张忠  李文  杨焱  
【摘要】:猴头菌(Hericium erinaceu)是我国著名的珍贵食药兼用菌,其主要的生物活性成分是猴头菌多糖,具有免疫调节、抗癌、降血脂和保护胃黏膜等多种功效。基于猴头菌三代全基因组测序和多糖的差异多组学分析结果,对一株高产多糖的猴头菇突变株的关键基因进行挖掘,发现编码UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因A6180在突变株中显著上调,可能和猴头菇多糖高产有关。为了验证该基因在多糖合成过程中的关键功能,在对其编码序列进行密码子优化后,分别在大肠杆菌和酿酒酵母中进行异源过表达来验证其酶学性质及生物学功能,为在猴头菌中进行过表达获得高产多糖菌株奠定基础。在大肠杆菌中异源表达的重组蛋白经过纯化后进行对其酶学特性进行测定,可以高效地将UDP-葡萄糖转化成UDP-半乳糖,相关酶活达(1.107±0.07) U/mg,证实了此目的基因发挥着UDP-葡萄糖-4-差向异构酶活性。同时在酿酒酵母中的异源表达的结果也初步验证了该基因对猴头菇活性多糖结构和功能有着关键作用。本研究利用分子生物学技术进行高产多糖优势菌株关键基因进行功能表征,为猴头菇生物活性多糖合成途径的解析奠定基础。

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