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《第二届中国林业学术大会——S9 木本粮油产业化论文集》2009年
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油茶过氧化物酶基因家族的cDNA克隆与原核表达

田晓明  谭晓风  罗茜  郭静宜  谷振军  
【摘要】:过氧化物酶(Peroxidase,POD)是植物保护酶系的重要保护酶之一。以油茶(Camellia oleifera)近成熟种子cDNA文库和EST文库为材料,根据已有序列信息设计基因特异性引物,通过5′RACE和3′RACE,获得了5个油茶POD基因的全长cDNA序列。核苷酸序列分析结果表明,扩增得到的5个POD基因在编码区高度保守,而在5′UTR和3′UTR则存在显著差异。氨基酸序列分析结果显示,除POD2编码333个氨基酸外,其余四个均编码337个氨基酸。根据二级结构预测结果推测,油茶POD属于第Ⅲ类植物过氧化物酶超家族。以克隆到的POD5全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到表达载体pET32a上并转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。经过37℃条件下的IPTG诱导,POD重组蛋白在BL21(DE3)菌株中得到表达。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
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【相似文献】
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