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三维回转条件对MC3T3-E1和MG-63细胞骨架蛋白β-actin及α-tubulin表达的影响

韩晶  骞爱荣  商澎  
【摘要】:太空飞行和模拟失重会使细胞骨架的形态发生变化,但对其基本组成成分微管蛋白tubulin,肌动蛋白actin含量的变化未见报道,本文以成骨样细胞MG-63、MC3T3-E1为研究对象,定量研究三维回转模拟失重对两种成骨样细胞β-actin、α-tubulin在基因及蛋白水平的变化。本研究采用三维回转仪模拟失重效应,分别在回转12h,24h及48h后收集样品,进行如下分析:1)共聚焦显微术检测MG-63、MC3T3-E1细胞F-actin/G-actin分布;2)SimplePCI图象分析软件定量分析两种细胞F-actin、G-actin表达;3)定量荧光PCR检测α-tubulin,β-actin表达量;4)Western Blot检测回转后两种细胞α-tubulin蛋白表达量。结果表明,三维回转模拟失重12h和24h,对照组MG-63细胞G-actin整个细胞均有分布但主要集中于核周,回转后MG-63细胞G-actin弥散分布于整个细胞,F-actin变化不明显。MC3T3-E1细胞经三维回转模拟失重24h后,对照组细胞G-actin在细胞核位置形成一亮斑,回转组细胞无该现象;F-actin对照组束状均匀分布在细胞内部,回转后偏向细胞边缘。Western Blot检测结果表明,三维回转24h后,两种细胞tubulin表达上调,差异具显著性。

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