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《全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集》2011年
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MTA1过表达稳转细胞系的建立及其在结肠癌发生发展中的作用

刘健  钱海利  黄常志  
【摘要】:目的探讨MTA1在结肠癌发生发展过程中的作用,并透过构建过表达稳转细胞系研究其发生作用的机理。方法免疫组化方法检测30例结肠癌组织,8例匹配的癌旁正常组织及10例匹配的转移癌组织MTA1蛋白的表达,并分析MTA1蛋白表达与结肠癌患者临床病理特征的关系,包括患者年龄、性别、癌组织分化程度、浸润深度、临床分期及有无淋巴结转移等;另外通过RT-PCR技术合成hMTA1的完整CDS,利用分子生物学技术将其克隆到慢病毒表达载体pMX中,并在其序列后加上flag标签及IRES-EGFP共表达绿色荧光标签。通过构建慢病毒,感染HCT116及HCT8细胞系,以绿色荧光为标志筛选稳转细胞系,研究其过表达引起的生物学效应改变。结果 MTA1在肿瘤原位组织及转移组织中的表达要明显高于正常组织(P0.01);在死亡组病人的表达要明显高于五年生存期病人(P0.01)。通过GFP的表达筛选出MTA1不同表达水平的稳转细胞系,并且验证了IRES连接的上下两个基因的表达具有明显相关性。MTA1过表达后细胞在增殖速率,侵袭转移,克隆形成率等恶性表型上明显高于对照组。结论 MTA1在结肠癌中的高表达与结肠癌的疾病进展密切相关,有望成为基因治疗的新靶点。

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