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《中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会第八届学术会议论文集》2011年
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稳定表达红色荧光蛋白的人脑胶质瘤干细胞的建立及其生物学特性观察

陈金明  陈桂林  韦永新  谢学顺  孙婷  苏作鹏  陈雄辉  吴庭枫  陈三送  丁大冬  曹广辉  王君祥  谭卫国  冯鸣  黄煜伦  周幽心  杜子威  
【摘要】:目的建立稳定表达红色荧光蛋白(RFP)的人脑胶质瘤干细胞。方法用带有红色荧光蛋白基因的慢病毒转染人脑胶质瘤干细胞(SU2),经流式细胞仪进行克隆筛选,荧光显微镜下观察RFP阳性细胞,PCR及DNA测序鉴定基因组中RFP的整合,并通过细胞荧光免疫组化CD133,Nestin鉴定干细胞特性,加含胎牛血清培养基诱导干细胞分化,GFAP,S100,A2B5鉴定诱导分化后细胞特性,以及对转染后人脑胶质瘤干细胞形态学检查、细胞增殖能力测定及致瘤性评价等进行了转染人脑胶质瘤干细胞的生物学特性分析。结果慢病毒转染率高达95%以上,10次传代前后RFP表达无明显差异;通过流式细胞仪筛选,建立了一种稳定、长期表达RFP的人脑胶质瘤干细胞;PCR及DNA测序证实RFP基因已成功整合入人脑胶质瘤干细胞;生物学特性分析表明转染前后的人脑胶质瘤干细胞没有明显改变。结论以RFP为生物标记物的人脑胶质瘤干细胞成功建立,可为将来研究人脑胶质瘤干细胞的深入研究提供理想的材料。
【作者单位】:苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室
【分类号】:R739.41

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