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《第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集》2006年
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肝细胞癌患者血清蛋白质指纹图谱检测及其临床意义

耿鑫  李悦国  张维铭  
【摘要】:目的:运用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱 (Surface—enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测肝细胞性肝癌(以下简称肝癌)患者和正常人血清蛋白质指纹图谱表达差异,筛选肝癌特征性血清标志物。为肝癌的临床早期诊断和药物靶点筛选提供可靠的、准确灵敏的实验室参考指标。方法:应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测25例未经过的治疗肝癌患者、25例经介入治疗后的肝癌患者和50例性别、年龄匹配的正常健康人血清,获得弱阳离子交换(WCX2)芯片的蛋白质指纹图谱。用BioMarker Wizard软件分析肝癌和正常人血清的差异蛋白质。结果:1.应用WCX2芯片在未经过治疗的肝癌患者、经介入治疗后的肝癌患者和正常人血清中检测到在不同质荷比处有七个差异蛋白质峰。2.经过BioMarker Wizard软件分析,质荷比为 6489.48Da(P1)、6662.34Da(P2)、8593.75 Da(P4)、8720.23 Da(P5)处的四个差异蛋白质含量在正常人组明显高于未经治疗肝癌组和经介入治疗后的肝癌组,质荷比为7777.27Da(P3) 和9250.00Da(P6)处的两个差异蛋白质在未经治疗肝癌组明显高干经介入治疗后的肝癌组和正常人组,质荷比为16200.17 Da(P7)处的差异蛋白质含量在经介入治疗后的肝癌组明显高于未经治疗肝癌组和正常人组。3.利用Biomarker Pattern 软件对75例血清标本(25例未经治疗的肝癌患者和50例正常人)进行盲法测试,结果发现只有7777.27Da、9250.00Da2个蛋白质能够对正常人和未经治疗的肝癌患者进行鉴别。灵敏度为92%(23/25,5例AFP20ng/ml有3例正确分组,2例未鉴别出),特异度为100%(50/50)。4.对这七种差异蛋白质进行数据库搜索(http://us.expasy.org/tools/tagident.html), 分别得到了与之分子量最为接近的七种蛋白质。P1-P7分别为:Galanin相关肽,Pro—neuregulin-4蛋白、小诱导细胞因子A15前体、9 kDa蛋白、CSL型锌指包涵蛋白1、线粒体铰链蛋白、Actin相关蛋白。结论:1.应用SELDI-TOF-MS 筛选肝癌患者血清特异性生物标志物的方法快速、有效,操作自动化。2.检测到的这七种差异蛋白质可能参与了肝细胞性肝癌的发生、发展过程,有可能成为治疗肝癌的候选药物靶点。

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