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《第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集》2006年
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三氧化二砷通过凋亡及坏死杀伤胃癌MGC803细胞

张敬东  刘云鹏  
【摘要】:目的:研究不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对胃癌 MGC803细胞的杀伤机制。方法:应用MTT法检测As2O3对胃癌MGC803细胞的细胞毒作用,应用流式细胞仪检测细胞线粒体跨膜电位(△ψm)及细胞周期解析,通过形态学观察细胞分裂及凋亡,应用Western Blot检测对凋亡相关基因 BCL-2及Caspase3蛋白的表达。结果:1.As2O3呈时间、浓度依赖性抑制胃癌MGC803细胞的增殖,72h IC50浓度为3 μ M。2.细胞形态学观察可见M期周期阻滞及细胞凋亡。5 μ M As2O3作用12、24、48h后出现亚二倍体峰及G2/M期阻滞,25μM As2O3作用后未见明显的细胞周期阻滞及凋亡。 3.5 μ M的As2O3作用后24h后表现为细胞以PI染色阴性, 罗丹明染色阴性为主的细胞线粒体跨膜电位(△ψm)下降为主,5 μ M As2O3作用24h后细胞出现Rhodamine-PI-即线粒体跨膜电位(△ψm)降低的细胞由对照的1.2%增加到 32.8%,25 μM的As2O3作用后24h,细胞表现为PI染色阳性罗丹明染色阴性的细胞坏死为主,25 μ M的As2O3作用24h 后Rodamine+PI+的坏死细胞由5.9%增加到72.2%。4.5 μ M As2O3作用12~48h BCL-2蛋白表达无变化,作用12h 后出现磷酸化,36h磷酸化最强。25 μ M的As2O3作用24h, 未引起BCL-2蛋白磷酸化。5.5μM As2O3作用12~48h, Caspase3在12小时后出现活化,25μM的As2O3作用24h未引起Caspase3活化。结论:低浓度三氧化二砷选择性诱导胃癌MGC803细胞G2/M期阻滞及细胞凋亡,其机制可能为 BCL-2蛋白磷酸化丧失其抗凋亡作用,通过活化Caspase3引起细胞凋亡来完成。高浓度三氧化二砷未引起BCL-2蛋白磷酸化及Caspase3活化,而是通过引起细胞坏死来杀伤胃癌 MGC803细胞。

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