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《第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集》2006年
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谷胱甘肽修饰的纳米Fe_3O_4与人肺腺癌细胞SPC-A1相互作用的初步研究

鄢祝兵  段友容  马勇杰  古宏晨  徐宏  
【摘要】:目的:在体外研究共沉淀法合成的谷胱甘肽(GSSG) 修饰的纳米Fe3O4与人肺腺癌细胞SPC—A1间的相互作用。方法:1.采用共沉淀法合成GSSG修饰的纳米Fe3O4,通过透射电镜(TEM)观察,X-射线衍射(XRD)分析,傅立叶-红外转换(FT—IR)光谱等方法表征GSSG修饰的纳米Fe3O4。 2.分别通过光学显微镜,透射电镜观察加入GSSG修饰的纳米 Fe3O4培养后SPC—A1细胞形貌变化及细胞传代后纳米Fe3O4 在细胞质内分布状态,采用四唑盐(MTT)染色法,乳酸脱氢酶 (LDH)试剂盒检测法,血球计数板计数法等方法,测定加入 GSSG修饰的纳米Fe3O4培养后SPC—A1细胞存活率与LDH 释放水平变化,测定吸收GSSG修饰的纳米Fe3O4后细胞生长曲线变化。3.采用原子吸收光谱(AAS)分析法进行GSSG修饰的纳米Fe3O4在SPC-A1细胞表面粘附量及SPC-A1细胞对 GSSG修饰的纳米Fe3O4内吞量的定量研究。4.培养不同时间后的透射电镜结果显示SPC-A1细胞逐步对GSSG修饰的纳米Fe3O4的内吞过程。SPC-A1细胞骨架结构受到破坏后,研究SPC—A1细胞对GSSG修饰的纳米Fe3O4的内吞状况的变化,推测SPC—A1细胞对GSSG修饰的纳米Fe3O4的内吞机理。结果:1.GSSG修饰的纳米Fe3O4为均匀的球形粒子,粒径为 7~15nm。GSSG修饰的纳米Fe3O4在水溶液中形成磁流体,超声处理后具有良好的分散性与稳定性。2.在一定浓度范围内 (0~1.5mg/ml),GSSG修饰的纳米Fe3O4对细胞的形貌,存活, 传代,生长曲线没有显著影响,显示了较好的生物相容性,透射电镜观察内吞的粒子可以在SPC—A1细胞内保留数代,显示了细胞对纳米粒子的高保留性。3.SPC—A1细胞对GSSG修饰的纳米Fe3O4的内吞需要能量,内吞量依赖于浓度及培养时间,单个细胞铁的内吞量最大可达160pg。4.SPC—A1细胞对 GSSG修饰的纳米Fe3O4的内吞过程为纳米Fe3O4首先内化入有披小泡,随后进入内涵体,溶酶体,最终从溶酶体释放到胞浆中。SPC—A1细胞对GSSG修饰的纳米Fe3O4的内吞机制可能主要为胞饮作用。结论:采用共沉淀法合成的谷胱甘肽修饰的纳米Fe3O4具有良好的生物相容性与安全性。SPC—A1细胞对GSSG修饰的纳米Fe3O4为逐步内吞过程,内吞量随浓度增加而增加,随培养时间增加会达到饱和,内吞机理以液相胞饮作用为主。GSSG修饰的纳米Fe3O4在细胞标记,核磁共振造影,磁介导热疗,磁转染等生物医学中具有潜在应用价值。

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