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《第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集》2006年
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色素上皮细胞衍生因子对脑胶质瘤抑制作用的研究

张弢  关明  吕元  
【摘要】:目的:脑胶质瘤源自脑内神经胶质细胞,是最常见的脑部恶性肿瘤,其恶性表型以迅速增殖、局部侵袭和血管生成为主要特征。鉴于色素上皮细胞衍生因子(PEDF)的神经营养、神经保护特性,“胶质细胞静息”效应和对新生血管的抑制作用,本研究评价重组色素上皮细胞衍生因子 (rPEDF)对与胶质瘤有关的血管活性因子、增殖和侵袭的影响。方法:酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素-1(17SP—1)的变化; MTT[四甲基偶氮唑蓝,3-(4,5-dimthy-2-2 thiazoly)法检测胶质瘤细胞增殖率;细胞侵袭实验检测rPEDF抑制胶质瘤细胞侵袭性。建立SCID小鼠模型, rPEDF对胶质瘤进行治疗,免疫组化检测C D 3 4,并计算抑瘤率。参照 Weidner方法计数肿瘤内微血管密度(Microvascular density, MVD)。结果:实验数据显示:rPEDF在下调VEGF的表达的同时明显增加TSP-1的表达(P0.001),显示出抑制胶质瘤血管新生的特性。当rPEDF浓度达时25ng/ml时, 就开始抑制胶质瘤细胞的增殖;当其作用浓度增加时,抑制率也增加,两者之间存在着明显的量效关系;侵袭实验结果都表明,将rPEDF加入胶质瘤细胞后, A172细胞穿透数目有明显下降,即使在加入促进胶质瘤血管生成最有效因子的 -VEGF的条件下,肿瘤细胞穿透数仍明显低于对照组,差异具有显著性(P0.05),表明rPEDF能有效抑制胶质瘤细胞的体外侵袭性,甚至在VEGF存在的条件下。本研究采用皮下接种法首先成功的建立了裸鼠的胶质瘤模型,实验组在接受rPEDF瘤周注射后,瘤块生长速度明显慢于只接受 PBS注射的对照组,抑瘤率为53%,表明rPEDF可以抑制胶质瘤的生长。已经有报道指出,虽然PEDF是一个多功能的蛋白,它抑制肿瘤生长主要依赖的是它的抗血管生成的功能。我们通过检测微血管密度来评价rPEDF对胶质瘤血管新生的影响。免疫组化结果表明对照组小鼠CD34染色强阳性,提示胶质瘤中有丰富的新生血管的存在;rPEDF处理组小鼠可见明显的微血管密度减低,定量分析结果表明微血管密度减少达55%,这与rPEDF处理组肿瘤体积减少53%的结果相近,从而提示胶质瘤血管新生的减少是导致肿瘤生长缓慢的机制之一。

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