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《2000全国肿瘤学术大会论文集》2000年
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人源野生型p53基因在烟草中的表达

曹宛虹  陈杭  李晓东  辛世文  郑树  
【摘要】:p53基因是一种肿瘤抑制基因,野生型 p53蛋白是细胞增殖的负调节因子,可调控细胞的生长与分化,抑制细胞的非正常性增殖。p53基因的丢失、重排、插入和突变都可能使其丧失原有的负调节功能,刺激细胞无限增殖,导致肿瘤的发生。引入外源的野生型 p53基因或蛋白可以抑制多种体外培养或带瘤模型动物的肿瘤细胞的生长,因此有可能成为 p53基因突变型肿瘤的一种基因疗法。为解决国内野生型 p53蛋白的来源问题,已有研究者尝试在大肠杆菌中表达 p53蛋白。本研究试图在高等植物中获得高效正常表达的人源野生型 p53蛋白。本研究采用植物种子特异表达的菜豆蛋白基因的启动子和终止子作为 p53基因在植物中表达的启动子和终止子, 在农杆菌中应用 pBI121质粒构建了人源野生型 p53基因的植物种子特异表达载体,并通过叶盘转化法将其导入烟草中。经过 GUS 报告基因表达的筛选,获得了12株阳性植株。Southern 杂交结果显示,p53 基因已整合到烟草的基因组中,首次获得了转入源野生型 p53基因的烟草植株,并收获了大量的种子。将转基因烟草种子的可溶性蛋白提取,经 SDS-PAGE 分离后进行 Western 杂交。杂交结果表明,转基因种子在53 kD 附近有一明显条带,而野生型种子则无此带。证明 p53蛋白已经在烟草种子中表达,属世界首次报道。
【作者单位】:北京蔬菜研究中心 北京蔬菜研究中心 西北农林科技大学 香港中文大学生物系 浙江大学医学院
【分类号】:R73-36
【正文快照】:
人源野生型p53基因在烟草中的表达@曹宛虹$北京蔬菜研究中心 @陈杭$北京蔬菜研究中心 @李晓东$西北农林科技大学 @辛世文$香港中文大学生物系 @郑树$浙江大学医学院p53基因是一种肿瘤抑制基因,野生型 p53蛋白是细胞增殖的负调节因子,可调控细胞的生长与分化,抑制细胞

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