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肿瘤相关抗原Kinectin蛋白在肝癌组织的表达及其在肝癌发生中的作用研究

晁耐霞  吴春林  赵飞兰  肖飞  蒋日婷  黄天明  曾庆堂  李日伦  谢小薰  罗国容  
【摘要】:Kinectin蛋白位于内质网膜上,在细胞内主要作为Kinesin受体参与细胞内的囊泡转运及内质网形态的维持。本实验采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测了Kinectin在肝癌和相应的癌旁组织内mRNA和蛋白水平的表达情况;同时通过shRNA技术沉默肝癌细胞株BEL-7404内Kinectin的表达,并检测其对BEL-7404细胞生长,迁移和侵袭等生物学行为的影响。虽然实时定量RT-PCR结果显示Kinectin mRNA在肝癌和癌旁组织内的表达没有显著差异(P0.05);但免疫组化结果显示Kinectin蛋白在肝癌组织的表达显著高于癌旁组(P0.05),且Kinectin蛋白的表达与患者的肝硬化有一定的相关性(P0.05)。本文通过shRNA技术成功构建了稳定的特异沉默Kinectin表达的BEL-7404肝癌细胞株KNT~(KD)。KNT~(KD)细胞的形态与未处理组BEL-7404及空载体转染组BEL-7404~(VC)没有显著差异,但细胞生长受到了一定的抑制(P0.05);且KNT~(KD)细胞迁移和侵袭能力与未处理组BEL-7404及空载体转染组BEL-7404~(VC)比较均显著下降(P0.05)。因此本研究为Kinectin在肝癌发生中作用机制的深入研究奠定了基础。

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