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《第十届全国化学生物学学术会议报告摘要集》2017年
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Stepwise evolution of CesA3 causing high CAA-resistance in Phytophthora sojae

Meng Cai  Weizhen Wang  Qin Peng  Xi Song  Brett M.Tyler  Xili Liu  
【摘要】:Flumorph is a carboxylic acid amide(CAA)fungicide expressing high activity against oomycetes.The sensitivity of 120 Phytophthora sojae isolates to flumorph was determined.The baseline sensitivities were distributed as a unimodal curve with a mean EC50 of 0.54μg/ml and no spontaneous resistance was detected.Five types of stable resistant mutants,exhibiting different resistance levels to CAAs,were obtained by flumorph adaption.Type I with a low resistance level was screened out from a wild-type isolate by exposure to a low concentration of flumorph.Types II,Type III,Type IV and Type V,with a higher resistance level to CAAs,were obtained with a higher frequency by exposing Type I to a higher concentration of flumorph.A point mutation I1027V was found in the cellulose synthase 3(CesA3)in Type I.Apart from I1027V,V1025L,G1020A,G1020S and Q992H were discovered respectively in Type II,Type III,Type IV and Type V isolates as well.Site-direct mutagenesis of the above mutations via CRISPR/Cas9 technology confirmed that I1027V indeed confer the low resistance to CAAs and with the assistance of V1025L,G1020A/S and Q992H,the resistance ability of P.sojae with I1027V to CAAs were proved significantly increased.In consideration of the resistance development process from sensitive to low resistance,then to high resistance,it is deduced that the genotype of CesA3 gene in P.sojae will probably evolve stepwise from the wild type to Type I,then to Type II,Type III,Type IV or Type V under the selection of flumorph.

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