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《第十届全国化学生物学学术会议报告摘要集(女性科学家论坛)》2017年
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基于共聚焦拉曼光谱的“一珠一化合物”肽库的单珠定量负载研究

唐浴尘  Yann Thillier  Ruiwu Liu  Xiaocen Li  Kit S.Lam  高婷娟  
【摘要】:"一珠一化合物"的组合化学方法被证明是寻找具有靶向功能的合成分子如多肽等的强有效途径。然而,很多时候一些初始筛选得到的阳性珠,重新合成后不再呈阳性,其原因有如下几个:1)解码错误,2)微量的杂质造成假阳性,3)单珠上化合物的较高负载(产率)使得结合效率被过高估计。为了应对这个挑战,我们发明了一种定量分析方法确定"一珠一化合物"肽库的单珠负载。这种方法的原理基于单珠上多肽N-端氨基的量与对其标记的特异信号分子的拉曼光谱强度呈正比关系。我们采用共聚焦拉曼光谱来表征有确定多肽序列的树脂珠和"一珠一化合物"的组合肽库的单珠多肽负载分布。实验结果表明,不同于起始原料TentaGel树脂珠和有确定序列的多肽树脂珠上氨基量的狭窄分布,肽库的单珠负载分布大幅变宽,尤其是对于序列较长的多肽库,这种现象更为明显。通过对肽库的负载分布(最大值/分布宽度)的定量表征,这种方法可用于监测和评价肽库的合成质量,并为深入了解"一珠一化合物"固相合成的复杂性和后续筛选的准确性提供有效的证据。

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