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《中国化学会·2016全国多糖研讨会论文摘要集》2016年
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霍山石斛多糖激活巨噬细胞的受体基础及其信号通路

解松子  郝冉  罗建平  
【摘要】:霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)属兰科石斛属,是一种传统的名贵药食兼用中药材,其茎具有生津益胃、滋阴清热、润肺止咳、保肝明目的功效。研究证明,多糖是霍山石斛茎的主要活性成分之一,其含量占干重30%以上,具有调节机体免疫、抗肿瘤、抗白内障、抗氧化、保肝等药理学活性。我们前期从霍山石斛中分离纯化出一个免疫调节活性多糖DHP,化学分析揭示DHP是由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成的部分乙酰化的半乳葡甘聚糖。本研究在前期证实DHP调节小鼠脾巨噬细胞免疫活性的基础上,以RAW264.7巨噬细胞为模型,旨在探究DHP与巨噬细胞结合的模式识别受体及其激活巨噬细胞的信号机制。采用流式细胞术、激光扫描共聚焦显微术、竞争性抑制实验证明DHP能与RAW264.7巨噬细胞表面专一性结合,且细胞表面含有识别DHP的模式受体;利用多糖亲和磁珠从巨噬细胞膜蛋白提取物中分离出DHP结合蛋白,经多糖亲和电泳、SDS-PAGE、Western blot鉴定,并经TLR4抗体中和实验和TLR基因突变C3H/HeJ小鼠实验的验证,表明与DHP直接结合的膜蛋白为模式识别受体TLR4。同时,基于Western blot和TLR4相关信号通路抑制剂PDTC(NF-κB)、SB203580(p38)、PD98059(ERK)、SP600125(JNK)、LY294002(PI3K)及TLR4抗体的运用,揭示DHP可以通过TLR4激活巨噬细胞内的下游信号通路,呈时间依赖性地促使ERK、JNK、Akt、p38的磷酸化,并促进了NF-κB p65的核转移。这些结果表明,DHP通过与TLR4直接结合,激发了TLR4介导的NF-κB、MAPKs和PI3K/Akt信号通路,进而激活巨噬细胞。
【作者单位】:合肥工业大学食品科学与工程学院
【分类号】:R285
【正文快照】:
霍山石斛多糖激活巨噬细胞的受体基础及其信号通路@解松子$合肥工业大学食品科学与工程学院!合肥230009 @郝冉$合肥工业大学食品科学与工程学院!合肥230009 @罗建平$合肥工业大学食品科学与工程学院!合肥230009霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)属

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