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螺旋藻类囊体膜的分离及光谱学特性初步研究

孟斌  王广策  孙海宝  曾呈奎  
【摘要】:用涂平板的方法分离单藻落螺旋藻,再用Zarrouk培养液扩种培养,收集对数期藻细胞。经超声波破碎细胞后,用蔗糖密度梯度(浓度分别为:10%、20%、30%、40%、 50%)进行超速离心 (140,000×g,210 min),得到三条明显的色素带。经过鉴定分析,这三条色素带均为类囊体膜。以活体藻细胞作为对照,用光谱法进一步分析这三种不同浮力密度的螺旋藻类囊体膜。以活体藻细胞作为对照,用光谱法进一 步分析这三种不同浮力密度的螺旋藻类囊体膜。 这三种类囊体膜分别位于 10~20%、20~30%和 30~40%蔗糖浓度处,依次编 号为带 1、11和Ill。三者的吸收光谱非常相似,在 437 urn有一主吸收峰,在 677 urn 处有一次峰,这为门汁绿素a的吸收峰;在490 urn有一吸收肩峰,为类胡萝卜素的 吸收;620 urn处有一很小的藻蓝蛋白吸收峰,这表明纯化的类囊体膜只含有极少 量的藻蓝蛋白。三条带的激发荧光发射光谱(Ilx:436 urn),发现光系统 1特征发射 峰 735 urn逐渐增强,而光系统*的特征发射峰 00s urn逐渐降低:带 1和带*的 69s 和 735 urn两个发射峰荧光强度的比值分别为 1.07(带 I)和 0.91(带*):而带 Ill在695urn处无明显峰形成,仅在735urn处形成一发射峰,两者比值约为0.56。 用 436 urn激发完整的螺}k藻细胞,荧光发射光谱与带*非常相似,在 695 urn处有 一个肩峰,发射主峰位于 735 nln,二者的比值也约为 0.56。 这个结果说明了两种可能:①在螺旋藻类囊体膜上陀1和陀11的分布可能是 不均匀的。经超声波删4后,从带 1到带*所含的 I,SI逐渐降低,而厂SI则逐渐 升高,尤其是带*的 PS非常明显,而 PSI己经变为微弱的肩峰。②自带 1到带 Ill,类囊体膜更为充整,因为 PSI吸收光能后能将能量传递给 PS而使属于厂SI 的荧光发射峰逐渐增强,尤其带*与完整的螺旋藻细胞的荧光光谱几乎亢全一致。

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