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基于四聚体远红荧光蛋白的八价纳米探针及其肿瘤靶向性研究

骆海明  
【摘要】:相对于抗体而言,靶向肽在活体内的半衰期短和亲和力弱,限制了其在肿瘤分子成像领域的应用。因此,研究者们大多会借助于纳米载体以增强靶向肽在活体内的滞留时间及其与肿瘤细胞的亲和力。本研究以四聚体远红色荧光蛋白(简称tfRFP)为支架,使用基因工程方法在tfRFP单体的两端分别偶联靶向肽,成功研制了一种能自组装的八价纳米荧光探针(简称Octa-FNP)。此探针通过一步法的制备方式,同时实现了多肽的多价偶联、荧光标记和纳米尺寸形成等功能。体外实验结果显示,Octa-FNP纳米尺寸约为10 nm,具有良好的血浆稳定性;细胞实验证明,阳性的鼻咽癌5-8F细胞对于八价Octa-FNP的摄取量是四价tfRFP-TP的15倍、单价mLumin-TP的80倍和零价tfRFP的600倍;活体光学成像与Western blot实验证实,Octa-FNP具有增强的肿瘤靶向性与胞内摄取能力,且在肿瘤与正常组织之间呈示出很好的特异性摄取对比度。综上所述,Octa-FNP探针具有制备方法简单、结构功能可精确控制和多价效应等特性,为多肽靶向能力的在体评价提供了强有力的工具。

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