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HSP70在PDT诱导的肿瘤细胞中的动态研究

周非凡  邢达  
【摘要】:随着光动力疗法(PDT)的发展,光动力学后作用的长期效应——免疫作用也愈来愈受关注。近年来的研究表明:作为分子伴侣的热休克蛋白70(HSP70)在肿瘤细胞中大量表达,并在肿瘤免疫调控中发挥显著作用。本文主要通过在细胞水平研究HSP70在PDT诱导的免疫调控中的作用,来探讨PDT诱导的免疫调控机制。实验中主要利用荧光成像技术对单细胞中PDT刺激后YFP-HSP70重组荧光蛋白的动态分布变化进行实时监测;同时,实验中还结合了荧光相关谱分析(FCS)技术,对PDT过程中胞内外 HSP70动态变化参数进行测量.实验结果表明:在PDT作用前,YFP—HSP70重组荧光蛋白大量表达于细胞质中,细胞表面只有少量分布;当细胞进行PDT处理后,细胞质中HSP70逐渐减少,细胞膜表面HSP70 逐渐增多,直至膜表面的HSP70表达量趋于稳定。该结果显示,PDT作用后,YFP-HSP70荧光蛋白从细胞质中向细胞膜表面发生迁移。但在此凋亡过程中,并未发现HSP70的释放.实验结果说明PDT刺激后, 在HSP70迁移于膜表面的过程中,可以携带大量肿瘤抗原表达于细胞膜表面,并作为免疫细胞识别的靶点,同时为呈递抗原于抗原呈递细胞(APC)提供了良好的条件,提高了免疫效应。由此可知,荧光标记的HSP70蛋白分子可以为细胞水平的免疫信号调控研究奠定了良好的实验基础。

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