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PPARD在肺癌中的表达差异及表观遗传学调控机制研究

左然  吴雯  李萍  袁建辉  
【摘要】:目的:研究在肺癌异常甲基化情况,筛选潜在的肺癌早期表观遗传生物标志物,为临床预防和治疗提供理论基础。材料与方法:选择正常肺上皮细胞、肺鳞癌与肺腺癌细胞为研究对象,利用Illumina 850k DNA甲基化芯片筛选肺癌相关的DNA异常甲基化修饰;甲基化特异性PCR(MSP)、实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blot方法验证肺癌细胞和组织中过氧化物酶体增殖物激活受体D(PPARD)启动子区DNA差异甲基化,并进一步分析PPARD表达变化。结果:Illumina 850k DNA甲基化芯片共检测出853307个CpG位点,筛选出差异甲基化位点2413个,1675个基因。与正常肺细胞相比,甲基化芯片示肺癌细胞PPARD启动子区域呈高甲基化(约81.25%),差异甲基化位点17个。MSP结果显示,其中5个甲基化位点在肺癌组织与细胞中均呈高甲基化,同时PPARD在肺癌组织中的表达均低于癌旁组织。另外,相较于中晚期肺癌组织,早期肺癌组织中PPARD表达更低,其启动子区5个位点甲基化升高。结论:PPARD基因及其启动子区DNA甲基化是潜在的肺癌早期筛查分子标志物,为肺癌早期临床诊断和治疗提供了科学线索

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