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Nrf2/ARE通路在白藜芦醇减轻PM_(2.5)所致血管内皮细胞损伤中的作用

李利忠  苑晓燕  王以美  彭双清  
【摘要】:【目的】本研究通过PM2.5作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),研究白藜芦醇对PM2.5损伤血管内皮细胞的保护作用,及其可能的作用机制。【材料和方法】体外培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度白藜芦醇(0、2.5、5、10μM)预处理细胞2h,以不同浓度PM2.5混悬液(0-250μg/cm~2)作用于细胞,染毒24h后采用CCK-8法检测细胞存活率;选用0、7.81、15.63、31.25、62.5、125μg/cm~2作为PM_(2.5)的染毒剂量处理HUVECs3h,应用H2-DCFDA荧光探针法检测活性氧(ROS)的生成;以62.5μg/cm~2浓度的PM_(2.5)作用于细胞24h,Western Blot法检测细胞Nrf2、Nqo1、HO-1、SOD2蛋白表达情况;应用siRNA干扰细胞Nrf2基因的表达,并再次检测白藜芦醇预处理后对PM2.5造成细胞损伤的改变。【结果】随着PM_(2.5)染毒剂量的增加,细胞存活率逐渐降低,细胞内ROS生成量逐渐上升;与对照组相比,相同PM2.5染毒剂量下,细胞存活率随白藜芦醇剂量升高而上升,细胞内ROS产生降低(p0.05);Western Blot结果显示与对照组相比2.5、5、10μM白藜芦醇预处理组细胞Nrf2、SOD2蛋白表达量升高(p0.05)。【结论】PM_(2.5)对HUVECs具有明显细胞毒性,白藜芦醇可能通过上调Nrf2/ARE通路,增加Nrf2等相关抗氧化蛋白表达,削弱细胞内ROS生成,从而减轻PM2.5所致血管内皮细胞损伤。

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