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人支气管上皮细胞5—脂氧合酶表达与丙烯腈的活化及细胞毒性

杨凤  胡建安  黄云  武越  熊敏如  
【摘要】:目的探讨细胞内5-LOX对外源化学物的代谢情况,为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途径提供进一步证据。方法在体外酶系统实验中用分光光度法检测反应终产物生成情况;通过MTT试验检测不同浓度的丙烯腈对HBE存活率的影响和各种抑制剂对HBE的保护率;用western-blot印记法检测不同浓度的丙烯腈对5-LOX蛋白表达的影响,用单细胞凝胶电泳实验检测不同浓度的丙烯腈染毒后DNA损伤情况,同时检测脂氧合酶特异性抑制剂AA861对5-LOX蛋白表达的调节以及各种抑制剂对DNA损伤的影响。结果在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化丙烯腈,氧化后生成2-氰环氧乙烷(CEO)。LOX抑制剂茶多酚可抑制该协同氧化作用,且在一定范围内呈剂量效应关系。丙烯腈可以使HBE内5-LOX蛋白表达增加,AA-861对5-LOX蛋白表达基本没有影响;丙烯腈可以对HBE产生明显细胞毒作用和DNA损伤,AA-861和萘普生可以明显抑制丙烯腈毒性和DNA损伤情况。结论 HBE可能主要通过5-LOX介导丙烯腈协同氧化,产生亲电子物质与DNA结合,造成DNA损伤。

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