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《中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议论文汇编》2008年
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SET-EGFP重组表达质粒的构建及表达

周丽  席仁荣  刘建军  邢秀梅  黄海燕  
【摘要】:目的构建癌蛋白SET与增强型绿色荧光表达载体(EGFP)的融合表达质粒pEGFP-N2-SET并获得表达。方法根据人SET基因序列。设计了一对含有Kozak序列、终止密码子、HindⅢ和KpnⅠ酶切位点的引物。从人L-02肝细胞提取总RNA,以逆转录后cDNA为模板,经PCR扩增获得SET基因片段,经双酶切后回收得到有以上两个酶切位点的SET基因片段,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pEGFP-N2载体中,获得重组质粒pEGFP-N2-SET。以Lipofectamine~(TM)2000为载体,将构建好的真核表达质粒转染到L-02肝细胞中进行瞬时表达。结果:经DNA测序鉴定证实,pEGFP-N2-SET重组质粒构建成功,经荧光倒置显微镜观察,证实了该载体能在细胞内进行蛋白表达。结论:SET表达质粒的成功构建及表达为其进一步结构和功能研究奠定了基础。

【相似文献】
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 周丽;席仁荣;刘建军;邢秀梅;黄海燕;;SET-EGFP重组表达质粒的构建及表达[A];中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议论文汇编[C];2008年
2 陈谋通;刘建军;黄海燕;何浩伟;蒋英芝;邢秀梅;;带His标签的癌蛋白SET真核表达载体的构建[A];中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第六届全国学术会议、中国毒理学会遗传毒理专业委员会第五届全国学术会议、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术会议、广东省环境诱变剂学会学术会议论文汇编[C];2008年
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