代谢活化增强苯并(a)芘诱导人上皮细胞转化效应
【摘要】：目的探讨不同的代谢活化系统在苯并(a)芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]诱导人细胞转化模型中的应用。方法选择人支气管上皮细胞HBETR,采用3种不同的代谢活化方式:分别为加入大鼠S9组分(S9-Mix)、高表达代谢关键酶P450 CYP1A1 (HBETR-1A1细胞)和染毒前48小时用低剂量B(a)P诱导(HBETR-IN细胞)。通过软琼脂克隆形成试验和裸鼠皮下成瘤试验来比较在不同的代谢活化系统下,间接致癌物B(a)P诱导细胞转化的效能。结果通过蛋白印迹和酶活性检测结果验证HBETR-1A1细胞构建成功。细胞的生物学特性没有明显的改变。20μM B(a)P染毒作用下HBETR-1A1、HBETR-IN细胞出现转化时间均为11周,而未加入活化系统时,HBETR细胞需14周才能获得恶性转化。HBETR细胞在加入和不加入S9-Mix的条件下,转化时间分别是14周、20周。上述转化的效果与CYP1A1酶活性以及蛋白表达水平相一致。结论三种代谢系统都能够促进间接致癌物B(a)P的代谢活化,缩短细胞的转化间期,提高细胞转化效率。从试验操作难度、试验的重复性及结果的可靠性等几个方面比较三种代谢系统应用的可行性,低剂量诱导作为新的代谢活化的方法在细胞转化试验中有着潜在的应用前景。
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