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《中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集》2007年
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正交设计优化狗牙根SRAP-PCR反应体系及引物筛选的研究

王志勇  袁学军  刘建秀  郭海林  
【摘要】:以SDS法提取的狗牙根[Cynodon dactylon(L.)Pers.]叶片DNA为模板,采用正交试验设计,从Mg~(2+)、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4种因素三个水平,对SRAP扩增效果进行研究,并比较不同浓度模板DNA对PCR扩增的影响,确立适合狗牙根SRAP-PCR反应的最佳体系。最后,利用SRAP-PCR优化体系对引物进行了全面筛选。结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响,狗牙根SRAP-PCR优化反应体系为:2μl 10×buffer、40ng模板DNA、Mg~(2+)1.25mmol·L~(-1)、dNTP260μmol·L~(-1)、Primer0.2μmol·L~(-1)、TaqDNA聚合酶1.0U,总体积20μl。运用该体系对9份狗牙根种源进行检验,证明该体系稳定可靠;以此体系为基础从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物34对。优化体系的建立及其引物的筛选为今后利用SRAP标记技术进行狗牙根遗传多样性研究、种质资源鉴定、亲缘关系分析等提供了实验依据。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
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【共引文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前6条
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