收藏本站
《中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)》2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

IL-28A在家蚕BmN细胞及蛹体中的表达

陆叶  张孝林  郑小坚  薛仁宇  曹广力  贡成良  
【摘要】:目的探讨IL-28A基因通过Bac-to-Bac家蚕杆状病毒表达系统在家蚕BmN细胞及蛹中进行表达。方法应用PCR、基因克隆及共转染等技术将IL-28A插入到家蚕杆状病毒多角体启动子的下游,构建重组病毒;并在家蚕细胞及家蚕蛹中表达IL-28A。用ELISA试剂盒检测感染24h、48h、72h、96h后家蚕培养细胞及蛹中(24h、48h、72h、96h、120h、144h)IL-28A蛋白的表达情况。结果获得含有IL-28A基因片段的重组杆状病毒表达载体pFastBacTMDual-IL28A能在家蚕细胞中表达IL-28A蛋白,感染后的培养细胞中可见绿色荧光;感染pFastBacTMDual-IL28A的家蚕蛹血淋巴能高效表达IL-28A蛋白。ELISA表明感染重组病毒96h的BmN细胞蛋白表达量最高为11.4μg/106细胞,蛹的血淋巴中120h最高为33.2μg/ml,感染重组病毒120h蛹粉为8.488mg/g。结论 IL-28A基因在家蚕蛹中能获得高效表达,为进一步研制IL-28A的口服制剂奠定科学的理论基础。

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 吴小锋;岳万福;刘剑梅;李广立;缪云根;;Bac-to-Bac系统的研究进展及在家蚕中的应用[J];蚕业科学;2007年01期
2 李明才,何韶衡;白细胞介素-28和白细胞介素-29的研究进展[J];医学研究生学报;2004年07期
3 杨瑞丽,任学毅,张耀洲;家蚕蛹表达的乙型肝炎表面抗原中蛋白口服免疫原性的研究[J];免疫学杂志;2003年06期
4 耿朝晖,郜鹏,刘莹,赵东明,张宝珠,俞新大,李建民;用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达人生长激素[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年01期
5 杨瑞丽,金勇丰,吴玉澄,张耀洲,吴祥甫;利用家蚕生物反应器生产有用蛋白的研究[J];浙江大学学报(农业与生命科学版);2001年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪涛;吴大洋;刘伦杰;石凉;李晓琴;;蚕蛹综合利用产品研发现状及原料前处理工艺探讨[J];蚕业科学;2009年03期
2 陈蔚;付凡;唐顺明;汪生鹏;黄金山;赵巧玲;沈兴家;;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在家蚕中表达人瘦素蛋白[J];蚕业科学;2011年02期
3 陈莉;李长友;郑桂玲;周洪旭;李国勋;;昆虫杆状病毒表达载体系统的研究进展[J];东北农业大学学报;2006年05期
4 李奕冉;姜玉新;李朝品;;昆虫蛋白对动物免疫功能影响研究进展[J];动物医学进展;2010年09期
5 陈玉珍;何韶衡;周艳春;黄阗;李明才;刘岳宁;陈霖霏;傅意玲;方泽漫;;抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定[J];广东医学;2006年03期
6 王昌河,蒋平,曹林,郭聪;家蚕生物反应器的研究进展及开发前景[J];四川动物;2004年04期
7 耿朝晖,刘莹,郜鹏,赵东明,李澍,俞新大,张宝珠;缩短5′-UTR序列可以提高hGH基因在昆虫细胞中的表达[J];生物工程学报;2002年04期
8 陈克平,徐家萍,姚勤;家蚕分子生物学研究进展[J];生命科学研究;2003年03期
9 王鸿鹤,朱孝峰,谢冰芬,冯公侃,沈竞康,刘宗潮;人细胞周期蛋白D1/CDK4基因的真核表达及生物活性鉴定[J];中国生物化学与分子生物学报;2003年06期
10 王芳,顾奇伟,武家才,张传溪;HaSNPV几丁质酶基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用[J];中国生物化学与分子生物学报;2004年06期
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 张文平;家蚕生物反应器生产的BmrhGM-CSF胶囊Ⅰ期临床试验及口服吸收机制的研究[D];浙江大学;2010年
2 刘小民;华北大黑鳃金龟中肠cDNA文库的构建及其围食膜靶标蛋白的分离与鉴定[D];河北农业大学;2011年
3 杨瑞丽;家蚕/BmNPV表达载体系统高效表达人乙肝表面抗原(PreS2+S)及表达产物免疫原性的研究[D];浙江大学;2002年
4 王芳;杆状病毒几丁质酶基因功能分析[D];浙江大学;2004年
5 王善辉;呼吸道合胞病毒亚单位疫苗的研究[D];内蒙古农业大学;2009年
6 蓝航莲;家蚕蛹表达人生长激素蛋白及其生物活性的研究[D];浙江大学;2009年
7 岳万福;基于家蚕杆状病毒表达系统表达外源基因研究[D];浙江大学;2009年
8 陆叶;家蚕生物反应器表达hIL-28A及其抗肿瘤能力评价[D];苏州大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 赵付伟;猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1的克隆、表达和抗病毒活性研究[D];华中农业大学;2010年
2 朱立明;家蚕TRAPα基因的表达与功能分析[D];浙江理工大学;2010年
3 汲生芝;家蚕新基因Bm29的表达分析及亚细胞定位研究[D];浙江理工大学;2010年
4 范忠玲;鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达及其活性检测[D];山东农业大学;2010年
5 胡婧;赤拟谷盗iap基因的克隆、表达模式及其分子进化分析[D];华中师范大学;2011年
6 刘翠萍;白细胞介素28B的基因多态性与干扰素抗丙型肝炎病毒治疗应答的关系[D];郑州大学;2011年
7 周汇敏;多角体融合的家蚕表皮膜蛋白N141的高效表达与纯化[D];浙江理工大学;2011年
8 高啸;甲型流感病毒样颗粒疫苗的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
9 马志明;基因打靶转基因桑蚕载体的构建及杆状病毒几丁质酶基因(ChiA)和半胱氨酸蛋白酶基因(CP)失活表达GIL-3的研究[D];苏州大学;2002年
10 朱一望;霍乱毒素B亚基乙肝表面抗原中蛋白融合基因在家蚕核型多角体病毒载体系统中的表达研究[D];浙江大学;2004年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 林蓉,李霁,张耀洲,吴祥甫;用蚕表达丙型肝炎抗原制备口服药物效果的研究[J];蚕桑通报;1998年02期
2 肖庆利,季平,何家禄,崔治中,秦爱建,吴祥甫;禽马立克氏病毒糖蛋白B基因在家蚕中的表达[J];蚕业科学;1997年02期
3 曹广力,华刚,贡成良,朱江,张志芳,张耀洲,吴祥甫;应用重组家蚕核多角体病毒在蚕体中表达人丙型肝炎病毒C区及E1区基因[J];蚕业科学;1999年04期
4 季平;张志芳;何家禄;吴祥甫;Peter Hing-Yat Lam;;慈菇蛋白酶抑制剂B基因在家蚕幼虫和蛹体中的表达[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;1997年01期
5 林松,宓怡德,戴聂红,吴祥甫,李伯良;重组人骨形态形成蛋白2在家蚕幼虫中表达及产物纯化[J];生物化学与生物物理学报;1996年04期
6 郭丽英,刘杰武,吴祥甫,周元聪;江浙蝮蛇神经生长因子在家蚕幼虫中的表达[J];生物化学与生物物理学报;1999年02期
7 邓继先,王少飞,杨琴,程萱,李琳;用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素[J];生物工程学报;1995年02期
8 周耐明,张颖,金伟,李载平,吴祥甫;乙肝病毒S基因在家蚕细胞及蚕体内高效表达[J];生物工程学报;1995年03期
9 段宇,汪承亚,赵红,陈家伟,张志芳,John S Sussenbach;利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中高效表达人胰岛素样生长因子-1的研究[J];中国生化药物杂志;2001年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴小锋,曹翠平,崔为正;应用脂质体介导技术改变重组杆状病毒感染方法[J];昆虫学报;2005年01期
2 费建明;吴岩;占鹏飞;施国方;王文兵;;利用家蚕杆状病毒Bac-to-Bac系统表达大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ[J];蚕桑通报;2011年02期
3 刘金明,傅志强,林矫矫,蔡幼民,桂仲争,庄大桓,吴祥甫;影响家蚕表达外源基因效率的几个重要因子的比较研究[J];中国兽医寄生虫病;2005年01期
4 黄自然,卢蕴良;家蚕血细胞的种类及其演变过程[J];蚕业科学;1963年03期
5 孙承铣,陆潜珍;家蚕夏秋季添水饲养的理论探讨[J];蚕业科学;1965年03期
6 王裕兴,马俊,潘民和,邹凤竹,牟志美;家蚕浓核病病毒流行病学的探讨[J];蚕业科学;1988年01期
7 ;《蚕业科学》(季刊)第17卷总目次[J];蚕业科学;1991年04期
8 戴玉锦,华刚;家蚕后部丝腺GPT的分离纯化与动力学性质[J];生物化学与生物物理学报;1994年04期
9 ;家蚕如何辨雌雄[J];农家顾问;1995年03期
10 刘春宇,张春玲,陈元霖;家蚕和蓖麻蚕的基因组RAPD检测[J];蚕业科学;1997年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陆叶;张孝林;郑小坚;薛仁宇;曹广力;贡成良;;IL-28A在家蚕BmN细胞及蛹体中的表达[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
2 刘艳艳;池旭娟;方向明;阚雪芹;苏媚;刘文倩;王海玲;谈建中;;家蚕蛋白激酶C受体基因Bmrack的克隆及序列分析[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(1)[C];2009年
3 李兵;许雅香;卫正国;陈玉华;沈卫德;;生产高品位生丝家蚕新品种(苏秀×春丰)的选育[A];中国蚕学会第六届家蚕和柞蚕遗传育种学术研讨会论文集[C];2009年
4 宋方洲;常平安;张平波;易发平;马永平;;家蚕Fib-H、Ser-1基因探针在家蚕和中国野桑蚕的对比荧光原位杂交(FISH)研究[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
5 宋方洲;常平安;张平波;易发平;马永平;;家蚕Fib-H、Ser-1基因探针在家蚕和中国野桑蚕的对比荧光原位杂交(FISH)研究[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
6 黄科;李春峰;范晓东;刘文明;周泽扬;;家蚕gapdh基因的克隆及分析[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(1)[C];2009年
7 张彩霞;鲍忠赞;周前凯;魏广兵;徐世清;司马杨虎;;家蚕正反交SAGE表达分析[A];中国蚕学会第八届暨国家蚕桑产业技术体系家(柞)蚕遗传育种及良种繁育学术研讨会论文集[C];2011年
8 苏金明;吴伟尉;司马杨虎;;家蚕试验小区雌雄比例差异性调查及分析[A];中国蚕学会第八届暨国家蚕桑产业技术体系家(柞)蚕遗传育种及良种繁育学术研讨会论文集[C];2011年
9 代方银;童晓玲;沈以红;罗亭玉;伴野丰;鲁成;向仲怀;;家蚕体形突变第2数珠蚕(mf-2)的遗传学研究[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(2)[C];2009年
10 黄德辉;孙家羿;李圣;童晓琪;李庆宝;余建国;;春用家蚕新品种681×682育成初报[A];中国蚕学会第六届家蚕和柞蚕遗传育种学术研讨会论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 李国 实习生 杨海霞;家蚕基因研究的意义到底有多大[N];工人日报;2009年
2 记者 刘传书 冯竞;我家蚕基因研究又获重要成果[N];科技日报;2009年
3 赵强社;家蚕中毒的防治[N];山西科技报;2003年
4 本报记者 吕媛;基因控制家蚕生男不生女[N];北京科技报;2004年
5 通讯员 王治奇 记者 夏桂廉;西南农大拥有家蚕基因序列世界第一[N];光明日报;2002年
6 本报记者 李鹏;刘春:发现家蚕突变基因[N];北京科技报;2010年
7 ;家蚕的病虫害防治[N];河北科技报;2003年
8 如皋市蚕桑站 孙杰;家蚕传染病的防治[N];江苏科技报;2001年
9 ;家蚕的饲养技术[N];河北科技报;2003年
10 记者 廖娴雅;美容福音:蚕丝可植皮[N];重庆商报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 于红松;家蚕黑色素合成途径基因的分子进化[D];西南大学;2011年
2 沈以红;家蚕几种组织的EST及基因表达特征分析[D];西南农业大学;2003年
3 甘玲;家蚕脑组织基因表达谱和神经肽及肽样基因的功能研究[D];西南大学;2011年
4 李斌;家蚕分子连锁图谱的构建和低分子量热激蛋白基因的克隆与特异表达[D];西南农业大学;2001年
5 黄少康;两种微孢子虫的蛋白及对家蚕侵染性的比较研究[D];浙江大学;2004年
6 陈复生;家蚕多倍体细胞遗传学研究[D];浙江大学;2003年
7 王永强;家蚕无性繁殖系的构建及其遗传特性研究[D];浙江大学;2002年
8 牛宝龙;家蚕(Bombyx mori) triosephosphate isomerase和transformer-2基因的克隆与染色体定位研究[D];浙江大学;2005年
9 唐云明;家蚕超氧化物歧化酶的分离纯化及其基因克隆[D];西南农业大学;2001年
10 司马杨虎;家蚕分子图谱的构建及茧质性状的QTL定位研究[D];西南农业大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈大霞;家蚕AFLP标记连锁图谱的构建与分析[D];西南农业大学;2003年
2 孙德斌;家蚕AFLP分子标记连锁图的构建[D];西南农业大学;2001年
3 刘玉明;家蚕EST分析系统的构建及初步分析[D];浙江大学;2005年
4 沈利;家蚕SSR标记和CAPS标记的筛选及其应用[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
5 梁丹军;家蚕Sir2基因的表达及其功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
6 邱咏梅;家蚕未受精卵表达序列标签(EST)分析[D];西南农业大学;2003年
7 李娟;家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂的多态性研究及其基因克隆[D];西南农业大学;2005年
8 刘运强;家蚕线粒体基因组全序列测定及分析[D];西南农业大学;2001年
9 程道军;家蚕大规模EST测序及脂肪体基因表达谱分析[D];西南农业大学;2003年
10 程安玮;家蚕颗粒人工饲料育的研究[D];山东农业大学;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026