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《中国病理生理学会受体、肿瘤和免疫专业委员会联合学术会议论文汇编》2010年
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肺炎衣原体感染促进血管新生的分子机制以及黄连素的干预作用

张丽莙  权伟  张利军  沈炳玲  叶静  王蓓蓓  刘欣  
【摘要】:目的:肺炎衣原体(C.pn)感染作为动脉粥样硬化新的危险因素备受关注。病理性血管新生是导致粥样斑块不稳定甚至破裂的重要原因,而血管内皮细胞迁移是血管新生的关键步骤。黄连素是从传统中药黄连等提取的生物碱,新近研究表明其可抑制细胞迁移并能阻止动脉粥样硬化的进展。那么,C.pn感染是否可诱导血管内皮细胞迁移和血管新生以及黄连素能否干预这一过程目前尚不清楚。本实验拟观察C.pn感染对人血管内皮细胞迁移和血管新生的影响,探讨黄连素的干预作用及其相关分子机制。方法:利用HEp2细胞培养增殖C.pn后,感染不同浓度黄连素(0、100、150、200μmol/L)或PI3K抑制剂LY294002预处理的血管内皮细胞。在感染C.pn后24 h、48 h、72 h,创伤修复实验和Transwel实验观察内皮细胞迁移的变化;逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附法检测内皮细胞中信号蛋白PI3K mRNA表达水平与酶活性。通过体外血管形成实验,观察内皮细胞在Matrigel上伸展、彼此交联形成的节点数。结果:与正常对照组比较,C.pn感染以时间依赖方式明显促进血管内皮细胞迁移(P0.01),且使PI3K mRNA表达水平显著升高,酶活性亦明显增强(P0.01);与C.pn感染组比较,LY294002组内皮细胞迁移量明显减少(P0.01),PI3K mRNA表达水平明显降低,酶活性也明显减弱;与C.pn感染组比较,黄连素中、高剂量组内皮细胞迁移量均明显下降(P0.01),PI3KmRNA表达水平与酶活性均明显降低,且PI3K mRNA表达水平(r_1)、酶活性(r_2)均与细胞迁移抑制程度呈正相关(r_1=0.841,r_2=0.832,P0.01),但低剂量黄连素组对内皮细胞迁移无明显影响。与正常对照组比较,C.pn感染组节点数较对照组明显增加(P0.01);而LY294002组以及黄连素中、高剂量组节点数较C.pn感染组显著减少(P0.05)。结论C.pn感染明显促进内皮细胞迁移以及血管新生,PI3K在此过程中发挥了关键作用;黄连素可拮抗C.pn感染诱导的内皮细胞迁移及血管新生,其机制可能与黄连素下调PI3K表达及抑制PI3K活化有关。
【作者单位】:天津医科大学基础医学院病理生理教研室
【分类号】:R543;R285.5

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