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《中国病理生理学会受体、肿瘤和免疫专业委员会联合学术会议论文汇编》2010年
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EB病毒潜伏膜蛋白LMP1调控转录因子EGFR和STAT3作用于Cyclin D1基因的分子机制研究

徐杨  石颖  刘旭莉  袁琪  曹亚  
【摘要】:目的:随着对EB病毒潜伏膜蛋白(Latent membrane protein1,LMP1)的深入研究,LMP1诱导鼻咽癌发生的分子机制不断被认识。本研究在我们前期已有的研究基础上,进一步探讨LMP1激活转录因子EGFR和STAT3相互作用后协同调节cyclin D1的分子机制。方法:以鼻咽癌细胞为模型,利用染色质免疫沉淀技术(CHIP)、PCR、电泳迁移率改变分析(EMSA)检查cyclin D1启动子区转录因子EGFR、STAT3共结合位点的存在及其结合能力;采用报告基因法和点突变技术分析LMP1调控转录因子EGFR和STAT3反式激活cyclin D1启动子的能力;以siRNA方法结合Real time PCR方法观察沉寂EGFR和STAT3基因后cyclin D1 mRNA水平的改变。结果:LMP1阳性表达的鼻咽癌细胞中cyclin D1基因启动子区存在转录因子EGFR和STAT3的共结合位点序列,并且LMP1可以增强转录因子EGFR和STAT3与cyclin D1启动子区的结合能力;LMP1可以调控转录因子EGFR/STAT3反式激活cyclin D1启动子活性,而将cyclin D1启动子区的EGFR和STAT3共结合位点序列进行点突变后cyclin D1启动子转录活性降低约一倍,P值0.05,差异具有显著性意义;将EGFRsiRNA,STAT3siRNA转染LMP1阳性表达鼻咽癌细胞,分别沉寂和共同沉寂EGFR、STAT3基因后,转录因子EGFR与STAT3同被沉寂的cyclin D1的mRNA水平低于EGFR或STAT3单独沉寂组。结论:LMP可以通过调控转录因子EGFR和STAT3作用于cyclin D1启动子区而调节cyclin D1基因的转录。
【作者单位】:中南大学肿瘤研究所
【分类号】:R739.63

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