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《第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编》2003年
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全反式维甲酸调节NB4细胞血管内皮生长因子基因表达的研究

傅建新  岑建农  白霞  王玮  陈子兴  阮长耿  
【摘要】:正 目的建立分析血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的竞争性定量逆转录聚合酶链反应(cQRT-PCR)方法,并监测全反式维甲酸(ATRA)对NB4细胞VEGF基因表达的调节。方法1.VEGF基因表达cQRT-PCR分析方法的建立:将259bp的VEGF基因扩增产物与pGEM-T Easy载体连接,用EcoRⅠ酶切鉴定阳性重组子T-VEGF;以RsaⅠ将T-VEGF质粒完全酶切,将两个大片段连接并用EcoRⅠ酶切和PCR扩增鉴定,重组质粒T-VEGF△用T7启动子引物进行测序。2.取一定分子数的T-VEGF△作为竞争模板,以连续稀释的T-VEGF作为待测样本并在同一反应体系中进行扩增,对259bp与241bp目的条

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