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《2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集》2011年
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建立以睾酮为探针的高效液相色谱方法测定CYP3A1酶活性

周望  邓多  周文菁  刘韬  黄红兵  
【摘要】:目的建立以睾酮为探针测定SD大鼠CYP3A1酶活性的简便,稳定,快速,重复性好的高效液相方法。方法以咪达唑仑为内标,采用HypersilC18分析柱(5μm,250×4.6mm),以甲醇‐10mMNa2HPO4水溶液(pH8.25)‐(60:40,V/V)为流动相等梯度洗脱,在254nm波长、流速为1mL·min‐1时检测样品。样品用乙酸乙酯萃取后,重溶进样,进样量为20uL。结果在1.25~100ug·mL‐1的范围内,6‐β‐羟基睾酮浓度与峰面积比的线性关系良好(r=0.9998),最低定量限为1.25ug·mL‐1;6‐β‐羟基睾酮的萃取回收率为83.9%~87.4%,RSD≤8.82%,相对回收率为100.4%~103.4%,RSD≤7.05%;平均日内、日间RSD均小于10%。样本萃取液放置24h以及样本室温放置4h,均稳定性良好。结论本实验所建立的高效液相方法简单稳定,重现性好,适用于体外测定睾酮及其代谢物6‐β‐羟基睾酮,也可用于体外评估CYP3A1酶活性以及相关酶动力学研究。
【作者单位】:华南肿瘤学国家重点实验室中山大学附属肿瘤医院
【分类号】:R965

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