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类叶升麻苷对D半乳糖所致衰老模型小鼠的实验研究

王冬艳  盛树东  孙云  
【摘要】:通过研究管花肉苁蓉化学成分类叶升麻苷对衰老小鼠皮肤中SOD、CAT、GSH-Px活力,MDA含量,皮肤羟脯氨酸含量的影响,以及对衰老小鼠皮肤、海马组织SOD和CAT基因表达及形态结构改变的影响,探讨其延缓衰老的作用及其机制。ICR小鼠随机分为:正常对照组、模型组、阳性对照(人参皂苷60.0mg·kg~(-1)·d~(-1))组、药物干预低、中、高剂量组(类叶升麻苷12.5,25.0,50.0mg·kg~(-1)·d~(-1)),对照组与模型组每日灌胃20mlmg·kg~(-1)·d~(-1)蒸馏水,连续6W。除对照~(21)组外各组提前1周腹腔注射D-gal 500mg·kg~(-1)·d~(-1)建立衰老模型。实验时,小鼠取血分离血清,分别检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,丙二醛(MDA)含量;处死,取背部皮肤,组织匀浆机制作10%皮肤匀浆,然后反复冻融3次,使其完全破碎,细胞内容物充分游离在液相中,测定总羟脯氨酸含量。取大脑皮层,制作10%脑组织匀浆;并取皮肤以RT-PCR检测SOD和CAT表达;取海马组织制作切片。结果:类叶升麻苷50.0mg·kg~(-1)·d~(-1)可增强D-半乳糖所致衰老模型小鼠血清与皮肤组织的SOD活力,显著降低MDA含量,并显著升高血中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,皮肤组织匀浆总羟脯氨酸含量亦显著升高,与模型组比较差异均有显著性(p0.01),提示类叶升麻苷不仅增强全身抗氧化功能,且可增强皮肤局部对自由基损伤的防护作用,减少脂质过氧化产物的产生、堆积,与模型组比较有显著性差异差异极显著(p0.01);其作用与阳性对照药人参皂甙组基本接近。解剖镜下观察可见海马轮廓清晰,光镜下观察切片可见海马的细胞密集,神经元细胞分支多,核大深染,核仁分叶清晰,细胞间排列整齐,界限清楚,与阳性对照组比较形态结构完好,无显著差异,与模型组比较,有极显著的改善作用。类叶升麻苷高剂量下对SOD和CAT表达水平均较模型组显著增强,说明类叶升麻苷可在基因水平上发挥调节抗氧化酶的作用。该作用可能并非简单的氧化还原反应,而是通过转录因子激活体内的抗氧化物酶类基因,提高SOD数量与活性,进而发挥抗氧化损伤作用。

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