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《2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集》2010年
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mPEG-PCL-g-PEI聚合物的合成及其siRNA递送性能

黄伟  吕明  金明姬  杨长青  高钟镐  
【摘要】:目的:合成siRNA递送载体mPEG-PCL-g-PEI,进行体外siRNA递送研究。方法:通过开环聚合反应制备二嵌段共聚物mPEG-PCL-OH,将mPEG-PCL-OH的羟基末端依次活化为羧基和琥珀酰亚胺端基形成mPEG-PCL-NHS活化物,然后将mPEG-PCL-NHS枝接到聚乙烯亚胺(PEI)的伯胺基上,得到PEI的接枝产物mPEG-PCL-g-PEI。应用FTIR,1H-NMR、GPC等对合成聚合物进行结构表征。采用合成聚合物材料通过复凝聚法制备载siRNA纳米粒。测定纳米粒的粒径和Zeta电位;通过体外转染实验,考察了不同N/P比的mPEG-PCL-g-PEI/siRNA纳米粒对萤火虫荧光素酶基因表达的抑制效率;比较mPEG-PCL-g-PEI聚合物和PEI两者递送siRNA的效果以及两种载体的细胞毒性。结果:成功合成聚合物(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k。(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k/siRNA纳米粒的粒径为50-200nm,纳米粒表面荷有正电荷(20mV)。粒径随着N/P比的增加而减小,Zeta电位随着N/P比的增加而升高;基因表达抑制效果在N/P=125时较好,与阳性对照组比较无显著差异(P0.01);(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k递送siRNA的能力强于PEI10K,两者具有显著性差异(P﹤0.01)。MTT结果显示,(mPEG5k-PCL1.2k)1.4-g-PEI10k产生的细胞毒性远远低于PEI10K。结论:聚合物mPEG-PCL-g-PEI合成工艺切实可行,制备简便,能够递送siRNA进入细胞来抑制报告基因表达,且细胞毒性较低,能够成为一种新型的siRNA递送载体。

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