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TF1细胞增殖法测定鼠神经生长因子(mNGF)生物学活性

韩春梅  于雷  范文红  史新昌  饶春明  
【摘要】:目前国际上常用的鼠神经生长因子(mousenerve growth factor,mNGF)生物活性测定方法主要有鸡胚背根神经节培养法和PC12细胞培养法两种,但是这两种方法的定量都不够精确,主观影响因素大。目的:建立并优化TF1细胞增殖法测定mNGF生物学活性。方法:mNGF倍比稀释,作用于TF1细胞,用MTT法测定细胞增殖曲线;对实验条件进行优化,包括细胞接种密度,细胞悬液清洗次数,细胞培养时间。结果:获得了比较稳定可靠的实验参数,细胞量为1.5×104/50ul/孔(96孔板),细胞沉淀用5mlRPMI1640培养基清洗2次,培养72h可以获得理想结果;利用该优化方法测定了国内两个厂家生产的mNGF制品的生物学活性,两样品生物学活性3次测定平均值分别为2226AU/ml和1338AU/ml,变异系数分别为5.64%和12.3%。结论:建立了TF1细胞增殖法,为mNGF活性测定提供了一种操作简便,准确度高,重复性好的定量测定方法。

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