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《2006第六届中国药学会学术年会论文集》 2006年
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人β干扰素-血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达

雷楗勇  张莲芬  杨健良  金坚  
【摘要】:利用重叠PCR技术在体外拼接IFNβ和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA。重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线性化,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到高拷贝转化子。PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot分析表达的融合蛋白IFNβ-HSA表明该蛋白分子量约为90kDa且具有HSA的抗原性;用细胞病变抑制法测定发酵液上清中融合蛋白的干扰素活性约为640IU/ml。

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