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《2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集》2006年
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带有IL-2基因佐剂的乙肝病毒DNA疫苗构建及其免疫效果的观察

吴晓娟  冷梅  赵大鹏  崔颖杰  张岩  汪春义  戚凤春  郭新  付学奇  
【摘要】:目的构建带有白细胞介素II蛋白佐剂基因的乙肝病毒DNA疫苗。方法将微小病毒内部核糖体进入位点基因克隆到质粒pVAX1载体多克隆位点,构建出DNA疫苗双表达载体pVAX1。将FCR扩增出的白细胞介素II基因和HBsAg基因分别连接在IRES基因的两侧,构建出能同时表达HBsAg和 IL-2蛋白佐剂的乙肝病毒DNA疫苗pHII。通过脂质体介导方法将pHII转染到COS-7细胞中,用HBsAg 检测试剂盒检测瞬时表达的结果。实验组的BALB/c小鼠用pHII免疫(1 00ug/只),阳性对照组用 pVAX/HBs免疫(100ug/只),阴性对照组用pVAX1免疫(1 00ug/只),并分别于第2周、第4周后加强免疫1次,检测免疫后小鼠血清中HBsAb量。13周后处死小鼠,用流式细胞仪检测其脾脏T细胞表面CD4+、CD8+分子的数量。结果在转染pHII质粒的COS-7细胞上清液中有HBsAg和IL-2的表达。第2周和第4周时,实验组和阳性对照组小鼠血清中分别检测出HBsAb,而阴性对照组未测出HBsAb, 以上三组均未检测出HBsAg。结论通过对实验组与阳性对照组统计结果的分析,表明带有IL-2蛋白佐剂基因的乙肝DNA疫苗的免疫效果要明显优于不带有分子佐剂基因的乙肝DNA疫苗。

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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【共引文献】
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