H-2Kd基因siRNA表达质粒的构建与鉴定

【摘要】：目的构建针对BALB/C小鼠H-2Kd基因siRNA表达质粒,为进一步研究H-2Kd基因功能奠定基础。方法选择siRNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSilencer3.0-H1连接,转化大肠杆菌DH5a扩增纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。结果纯化的质粒的分子量为2.8Kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论成功构建了针对H-2Kd基因的siRNA表达质粒。

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前20条

1	陈波,熊利华,华平,廖洪映,殷香保,汤志华,蒙荣森,邓伟;纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究[J];中山大学学报(医学科学版);2005年02期
2	华洋林,曹以诚,赵继伦;我国SARS疫苗研究的现状[J];生命的化学;2004年06期
3	史俊岩;王斯;刘兵;罗恩杰;;siRNA抑制哺乳动物细胞内Rab9 GTPase表达的研究[J];微生物学杂志;2007年03期
4	张勇,贾林涛,李庆霞,王成济,周士胜,杨安钢;容量调控氯通道基因siRNA表达载体的构建及其沉寂效应检测[J];第四军医大学学报;2005年09期
5	阚学峰,高英堂,杜智;SiRNA四种制备技术的介绍[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2004年04期
6	樊丽;许景伟;邹宇;;RNAi人端粒酶反转录酶(hTRET)真核表达载体的构建及鉴定[J];医学研究杂志;2009年07期
7	郭述良,罗永艾;RNA干扰及其在呼吸系统疾病研究中的应用[J];国外医学.内科学分册;2004年12期
8	曹明媚,任浩,赵平,潘卫,赵兰娟,戚中田;小干扰RNA对庚型肝炎病毒基因在人Huh-7细胞中表达的抑制作用[J];中国科学C辑;2004年04期
9	薛利军;siRNA对培养细胞内HCV RNA复制子的清除作用[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2003年05期
10	李阳,倪兵,石辛甫,王希良,何仰东,肖宇,姜曼,黎万玲,吴玉章;质粒表达型siRNA对SARS-CoV复制与感染干扰的初步研究[J];第三军医大学学报;2005年02期
11	邓志宽;吴静;程赛宇;赵士福;李黔宁;;靶向沉默大鼠星形胶质细胞VEGF表达siRNA的筛选[J];重庆医学;2009年21期
12	温丽君;滕军放;赵莘瑜;崔月梅;巴庆华;张爱玲;;APP695-siRNA慢病毒载体构建及其对SH-SY5Y细胞中APP695基因的沉默作用[J];郑州大学学报(医学版);2011年04期
13	李宁;siRNA介导RNAi的研究进展[J];国外医学.分子生物学分册;2003年02期
14	朱才,范学工,李宁,应若素;RNA干扰抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究[J];中华肝脏病杂志;2004年09期
15	李旭宏;RNA干扰-ds RNA介导的基因沉默[J];重庆医学;2004年02期
16	徐宁,陈智;哺乳动物RNA干扰中的小干扰RNA表达载体[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2004年04期
17	曹颖莉,刘力,王淑蕙;siRNA和miRNA及其抗病毒的研究近况[J];国外医学.病毒学分册;2005年02期
18	梅少林;RNAi在HIV感染中的作用[J];免疫学杂志;2003年S1期
19	许小亮,李君武;RNAi技术在临床中的运用[J];广东药学院学报;2005年01期
20	刘恒;李郑武;王莹;;乳糖酸修饰壳聚糖载体与siRNA结合体外稳定性研究[J];黑龙江医药;2009年04期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	庄学伟;邹雄;张义;王洪春;杨晓静;单宁宁;;H-2Kd基因siRNA表达质粒的构建与鉴定[A];第四届全国临床检验学术会议论文汇编[C];2006年
2	薛利军;曹明媚;秦照玲;潘欣;戚中田;;siRNA抑制结核分枝杆菌侵袭相关基因mcela在体外培养的人细胞内的表达[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
3	陈卫华;王跃闽;;Cb1-b特异性siRNA载体的筛选验证[A];华东六省一市泌尿外科学术年会暨2011年浙江省泌尿外科、男科学学术年会论文汇编[C];2011年
4	万志红;王宇明;黄燕萍;刘国栋;丁世涛;;针对HBV C基因启动子区的siRNA抑制HBV DNA复制的研究[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年
5	秦照玲;赵平;赵兰娟;戚中田;;小干扰RNA能抑制SARS-CoV Spike蛋白的表达[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
6	董继华;刘松兰;丁英俊;廖玉华;;siRNA对柯萨奇B_3病毒的抑制作用[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
7	周芯羽;陈晓钎;;脑红蛋白对抗过氧化氢诱导的细胞损伤作用及其机制[A];湖北省暨武汉市病理生理学会第十四届学术年会论文汇编[C];2008年
8	尹志康;吴小候;罗春丽;何云锋;刘川;杜虎;;TGF-β1基因特异性shRNA真核表达载体的构建及其基因抑制作用[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
9	季爱民;苏丹;车鸥;李文适;孙靓;张忠义;杨彬;;壳聚糖/siRNA纳米粒介导的功能性基因沉默研究(英文)[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
10	庄学伟;夏西燕;单宁宁;王洪春;张义;杨晓静;李晓丽;赵胜梅;邹雄;;H-2Kd基因siRNA表达质粒的构建及在小鼠LAK细胞的表达[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	李洁;Poly（A）增强siRNA对外源基因沉默效应的作用及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年
2	韩秋菊;双功能HBx-3p-siRNA逆转HBV免疫耐受及其分子机制研究[D];山东大学;2011年
3	曹明媚;庚型肝炎病毒作为复制型基因治疗载体及小干扰RNA对病毒表达复制抑制作用的研究[D];第二军医大学;2004年
4	兰世杰;BCCIP相互作用蛋白的鉴定与功能研究[D];吉林大学;2012年
5	詹鹰;构建siRNA抑制阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5基因表达治疗ED的研究[D];华中科技大学;2007年
6	徐娟;肠道病毒EV71 VP1基因的优化和免疫原性的研究[D];南京医科大学;2011年
7	刘韦成;p55PIK/NFκB通路在炎症调控中的作用及机制研究[D];华中科技大学;2012年
8	胡威;抑制Ppif基因的表达减轻肾缺血再灌注损伤的实验研究[D];华中科技大学;2010年
9	孙宇;猪天然抗病毒分子APOBEC3F对猪内源性反转录病毒的抑制作用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
10	龚凤云;siRNA分子干扰铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵MexB基因表达的效应研究[D];华中科技大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	周昕;几种AD相关基因的siRNA质粒的构建及其鉴定[D];华中科技大学;2009年
2	严莎;抑制coronin-1基因表达的siRNA质粒载体的构建及筛选研究[D];重庆医科大学;2010年
3	郑亚婷;应用siRNA技术抑制铜绿假单胞菌外膜蛋白OprM表达的研究[D];昆明医学院;2010年
4	马婧薇;ASGPR介导的靶向siRNA抑制HBV的复制与表达[D];华中科技大学;2009年
5	李杰;抑制PKM2的siRNA协同抑制CCND1的作用机制研究[D];安徽医科大学;2011年
6	吕玉春;靶向EV71 VP1基因siRNA真核表达质粒的构建及筛选研究[D];重庆医科大学;2010年
7	刘峰;Ⅰ.siRNA抑制CSB基因表达及对细胞增殖和辐射敏感性的影响　Ⅱ.α粒子诱发癌变细胞中p14和p16基因甲基化及表达变化[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
8	唐灵涛;RAN干扰小鼠间充质干细胞系C3H10 T1/2中B7-H4表达的体外实验研究[D];苏州大学;2010年
9	李哲;GLT-1基因siRNA真核表达载体的构建及其在大鼠神经胶质细胞中的抑制效应[D];第四军医大学;2010年
10	曹鹏;人脑胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）原核表达载体的构建及蛋白表达的鉴定[D];第二军医大学;2009年

中国重要报纸全文数据库

前10条

1	余志平;打开功能基因组学与未来治疗学的大门[N];中国医药报;2004年
2	杨霞;防治SARS药研发获阶段性成果[N];中国医药报;2004年
3	Wang Johson译;非病毒游离质粒基因载体技术获美国专利[N];中国高新技术产业导报;2002年
4	直尺编译;健康新武器——D N A疫苗[N];科技日报;2002年
5	卢苏燕;研究显示鼠疫杆菌有向抗多药性发展的危险[N];医药经济报;2007年
6	张中桥;四医大西京医院发现纳米粒可作 VEG F基因载体[N];中国医药报;2007年
7	;放线共生放线杆菌黏附性研究[N];科技日报;2006年
8	;促进生命科学领域跨学科交流[N];中国医药报;2005年
9	本报特约撰稿人陆志城;RNA干扰技术遭遇“缺陷危机”[N];医药经济报;2003年
10	张荔子;乳腺癌基因特异性药物曙光初现[N];健康报;2004年

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