收藏本站
《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会论文集》2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

鸡肉源沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌三重定量PCR检测

李慧芳  宋阔阔  姬晶晶  杨子龙  刘娜  刘彦威  刘利强  刘建钗  
【摘要】:鸡肉已成为人们日常生活的重要消费品,然而鸡肉及其制品中的一系列食品安全问题制约着其健康发展,其主要的致病菌有沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌等。目前对致病菌的检测虽有多种方法,但都存在一些问题,因此研究建立更高特异性、高通量、定量、快速的鸡与鸡肉制品中主要致病菌的检测方法显得尤为重要,可以为本地区开展鸡与鸡肉类产品的安全性研究、防控食源性疾病的发生提供技术支持。建立一种高通量、定量、快速检测技术,而定量PCR实现了PCR技术从定性到定量的飞跃,且适合多重反应。根据Gen Bank中已发表的禽源致病性沙门氏菌,金黄色葡萄球菌和肠球菌的基因组序列,采用Primer Express5.0软件分别设计一对特异引物,沙门氏菌扩增片段279bp,金黄色葡萄球菌扩增片段395bp,肠球菌扩增片段445bp,以SYBR Green I为扩增产物荧光染色剂,建立一种具有特异性、敏感性,且能快速检测鸡肉中沙门氏菌与金黄色葡萄球菌和肠球菌的三重SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,并进行反应体系的优化、敏感性分析、特异性验证、重复性试验,并用临床组织样本对该方法的特异性进行检测。结果显示研究以临床分离的禽源沙门氏菌,金黄色葡萄球菌和肠球菌为实验株,基于三重SYBR Green I荧光染色的LC-PCR技术,能扩增出特异性的目的片段,无引物二聚体;检测3种致病菌灵敏度达101cfu/m L;重复性熔解曲线趋于一致,且三种菌的Tm值可区分。从不同鸡肉中采集样本的DNA作为模板,经普通PCR方法进行检测,结果显示沙门氏菌扩增出大小约279 bp,金黄色葡萄球菌扩增出大小约395 bp,肠球菌扩增出大小约445 bp。经3重SYBR Green I荧光定量PCR方法进行检测,特异性扩增曲线,走向一致,熔解曲线趋于一致。且CT值与菌落相对应。说明该方法敏感性高、特异性强、重复性好,可用于禽源致病性沙门氏菌,金黄色葡萄球菌与肠球菌的快速和定量检测。

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张庆,张蕾;金黄色葡萄球菌和肠球菌糖肽类抗生素耐药机制及治疗[J];中国医院用药评价与分析;2001年05期
2 张庆,张蕾;金黄色葡萄球菌和肠球菌糖肽类抗生素的耐药机制[J];中国药房;2002年03期
3 吴光先;;全蛋液加工处理中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的变化[J];国外医学(卫生学分册);1983年01期
4 吴光先;全蛋液中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的污染[J];国外医学(卫生学分册);1982年05期
5 叶玉华;;乳粉中金黄色葡萄球菌与沙门氏菌定性检测能力验证结果与分析[J];食品安全导刊;2017年30期
6 张学峰;兰恒超;颜正财;卢智恩;余志刚;汪维龙;王艳丽;汤春梅;王文建;;致病菌在四川泡菜发酵过程中生长规律的研究[J];中国酿造;2013年04期
7 马志春;;食醋中醋酸对食品指标微生物的作用研究[J];食品安全导刊;2015年16期
8 林碧莲;柯振华;陈筱婷;许任伟;;多重实时荧光定量PCR快速检测婴幼儿奶粉中沙门氏菌、克罗诺杆菌和金黄色葡萄球菌[J];食品安全质量检测学报;2017年11期
9 王贞;周威;张浩;胡梁斌;莫海珍;金黄色葡萄球菌基因组编辑技术[J];基因组学与应用生物学;年期
10 胡志峰;魏臻武;;茶树油制剂对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的体外抑菌试验[J];草学;2018年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李慧芳;宋阔阔;姬晶晶;杨子龙;刘娜;刘彦威;刘利强;刘建钗;;鸡肉源沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌三重定量PCR检测[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会论文集[C];2018年
2 宋阔阔;李慧芳;杨子龙;刘洁玉;姬晶晶;刘建钗;刘彦威;刘娜;;牛奶中金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和沙门氏菌三重定量PCR检测[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会论文集[C];2018年
3 胡辛兰;陈发林;;院内感染金黄色葡萄球菌的分布及耐药性分析[A];第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编[C];2013年
4 李正军;;医院金黄色葡萄球菌的分布及耐药性分析[A];纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛论文汇编[C];2014年
5 刘倩;郭大文;;医院金黄色葡萄球菌的分布及耐药性分析[A];第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编[C];2015年
6 范锦戴;申晓晨;马若瑶;冯嘉琪;麦凯杰;曾志良;马静云;;一株金黄色葡萄球菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性研究[A];中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2015年学术年会论文集[C];2015年
7 温顺航;吴沪军;林立;李昌崇;;儿童金黄色葡萄球菌播散感染临床特点分析[A];2014年浙江省医学会儿科学分会学术年会暨儿内科疾病诊治新进展国家级继续教育学习班论文汇编[C];2014年
8 邹明祥;范学工;刘文恩;李宪;武文君;;金黄色葡萄球菌耐药性分析及脉冲场凝胶电泳分型研究[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
9 吴泽刚;李艳;吴青;汪明;顾剑;胡慧霞;徐万洲;;荧光原位杂交法(FISH)快速检测尿液中金黄色葡萄球菌[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
10 王良兴;;金黄色葡萄球菌致病性研究现状及进展[A];2011年第三十三届浙江省呼吸系病学术年会暨呼吸疾病诊治新进展学习班论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 郭静 通讯员 田乃伟;脸上的痘痘不可随便乱挤[N];广东科技报;2017年
2 Kate Baggaley 赖博;抗生素治疗失效后[N];北京科技报;2017年
3 本报记者 王嘉;加拿大鸡肉韩国鱼片因金黄色葡萄球菌污染被召回[N];中国质量报;2017年
4 云无心;如何远离金黄色葡萄球菌及其毒素[N];中国食品安全报;2016年
5 记者 桂运安;金黄色葡萄球菌入侵细胞新机制[N];安徽日报;2014年
6 记者 白毅;金黄色葡萄球菌ClpP调控机制被阐明[N];中国医药报;2011年
7 印高乐;金黄色葡萄球菌是异位性皮肤炎过敏原[N];中国中医药报;2003年
8 侯震;金黄色葡萄球菌致中毒[N];大众卫生报;2000年
9 记者 白毅;金黄色葡萄球菌感染宿主“帮凶”被找到[N];中国医药报;2014年
10 亓欣欣 黄宽伟;中毒罪魁:金黄色葡萄球菌[N];南方日报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姜秋;金黄色葡萄球菌PSMs的调控机制解析及毒性因子的筛选[D];中国科学技术大学;2017年
2 周义正;荆州地区金黄色葡萄球菌流行的特征及分子分型研究[D];武汉大学;2015年
3 崔俊昌;金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的体内外研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
4 王小红;金黄色葡萄球菌B型肠毒素的溶液构象及菌体生长环境效应[D];华中农业大学;2005年
5 李朝霞;喹诺酮药物对金黄色葡萄球菌体内体外耐药突变选择作用的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
6 杨宏军;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌毒力因子的克隆表达及生物活性研究[D];山东农业大学;2007年
7 向华;厚朴酚抗金黄色葡萄球菌作用机制的研究[D];吉林大学;2010年
8 胡园园;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的核酸检测方法研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2016年
9 王登峰;奶牛乳腺炎性金黄色葡萄球菌耐药基因检测、分子分型和耐甲氧西林菌株全基因组测序[D];中国农业大学;2016年
10 杨保伟;食源性沙门氏菌特性及耐药机制研究[D];西北农林科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 肖茜文;农产品加工中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌多重PCR检测试剂盒的研制[D];吉林农业大学;2017年
2 敬鸥;不同浓度外洗止痒方对金黄色葡萄球菌的抑菌作用[D];新疆医科大学;2018年
3 李穗霞;食源性金黄色葡萄球菌luxS基因缺失对环境耐受性及致病性的影响[D];西北农林科技大学;2018年
4 赵凌;金黄色葡萄球菌、大肠杆菌对BMEC主要炎性因子表达和细胞凋亡的影响[D];甘肃农业大学;2018年
5 宋方宇;生鲜肉中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及其耐药性研究[D];山东农业大学;2018年
6 陈佳佳;感染金黄色葡萄球菌后小尾寒羊乳腺组织及外周血中TLRs和CK的表达[D];甘肃农业大学;2018年
7 王礼;小檗碱抗金黄色葡萄球菌的机制研究[D];兰州大学;2018年
8 田赛;基于免疫磁分离及化学发光快速检测食品中的金黄色葡萄球菌B型肠毒素[D];天津理工大学;2018年
9 孙峥;金黄色葡萄球菌的毒力基因检测及耐药性分析[D];大连医科大学;2018年
10 王梦瑶;金黄色葡萄球菌GapC蛋白B细胞表位的鉴定与分析[D];黑龙江八一农垦大学;2018年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026