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《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十四次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会第二十三次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第三次学术研讨会、中国兽医病理学家第三次学术研讨会论文集》2018年
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高尿酸血症小鼠模型的构建及肠道免疫反应的研究

陈泽庆  邢士超  温建新  
【摘要】:高尿酸血症是高血压、脂肪肝、糖尿病和肾脏疾病等代谢性综合症的独立危险因素,NLRP3炎性小体分泌IL-1β在触发代谢疾病的先天性免疫反应中起关键作用。本实验试图研究可溶性尿酸是否通过激活NLRP3炎性小体而诱发肠上皮细胞功能障碍,通过分析可溶性尿酸引起肠上皮细胞的变化,探索可溶性尿酸对肠上皮细胞的影响及其作用机制,为疾病的肠道调理、防治奠定基础。本实验通过建立高尿酸动物模型和体外用不同浓度可溶性尿酸(s UA)处理肠黏膜上皮细胞24h,通过定量PCR、蛋白印记方法分析ATP结合膜转运蛋白(ABCG2)、紧密连接蛋白OCC和ZO-1、炎症因子IL-1β、TLR4/NF-κB和NLRP3等表达变化;采用DCFH-DA荧光探针检测线粒体活性氧(ROS)的变化,采用FITCdextran荧光标记物(FD4)检测高尿酸血症小鼠肠渗透性变化,并运用小RNA干扰技术进一步对可溶性尿酸引起肠道免疫反应进行研究。肠道上皮细胞在维持肠道内环境稳定方面发挥着关键作用。体外研究显示可溶性尿酸(s UA)具有直接促炎作用。研究表明高尿酸血症小鼠的肠道通透性高于野生小鼠。在体外实验中,观察到s UA能激活NLRP3炎性小体并诱导IL-1β的释放。在此过程中,ROS产生、线粒体膜电位(ΔΨ)降低。虽然TLR4的沉默可以减少IL-1β的产生,但并没有逆转IL-1β的产生。TLR4/NF-κB只是调节IL-1β产生的调节途径的一部分。提示s UA可引起肠上皮细胞炎症和肠通透性的改变。本研究首次提出了通过阻断尿酸或增加肠道尿酸溶解来预防高尿酸血症相关代谢性疾病的潜在策略。

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