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《全国首届动物生物技术学术研讨会论文集》2004年
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利用DNA芯片检测并鉴定禽流感病毒亚型

王秀荣  邓国华  于康震  乔传玲  刘丽玲  陈化兰  姜永萍  
【摘要】:流感病毒是属于正粘病毒科的RNA病毒,只有A型流感病毒可以在自然条件下感染鸟类。A型流感病毒基因组含有8个单股负链RNA病毒节段,从禽类中分离到15个血凝素、9个神经氨酸酶亚型。A型流感病毒感染家禽后根据致病力不同可以分为高致病力和低致病力病毒,高致病力毒株对禽有高度致死力,死亡率可高达100%,这些高致病力毒株均属于H5和H7亚型,但不是所有的H5和H7亚型流感都是高致病力的毒株。低致病力毒株大多数属于H9N2亚型,在全世界范围引起广泛的疾病综合症,H9N2病毒引起的病症比H5和H7禽流感引起的病症要温和得多,主要局限于呼吸道症状,但是在其他疾病病原合并感染或环境因素的协同下,临床症状可能严重得多。我们在基因芯片平台上建立了一种可靠地检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)的快速检测技术,实验中使用的毒株为A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)、A/African starling/983/79(H7N1)and A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)。本研究设计的DNA芯片可以用来鉴别禽流感病毒的亚型,通过RT-PCR获得大的500bp的禽流感病毒基因cDNAs片段,克隆,从重组质粒扩增DNA片段,并点到玻璃载体上,制成芯片。在病毒RNA反转录过程中,用Cy5标记做靶cDNAs。靶cDNAs是一个包括禽流感病毒HA、NS和M基因的混合物。依据M、NS基因鉴别型,依据HA基因鉴别亚型。扫描芯片上探针结合位点,杂交信号与预期设想基本一致。结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV诊断方法。

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【引证文献】
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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【二级引证文献】
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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