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组织工程技术构建活性人工角膜

刘德伍  邹萍  
【摘要】:目的眼烧伤等多种疾病所致的角膜缺损一直是临床上十分棘手而又关注的难题, 其患病率高,致盲性强,治疗困难。目前常用而有效的治疗方法是角膜移植术,但由于自体角膜移植需要切取较大的角膜缘组织块,对供体眼存在潜在威胁,患者常常担心累及健侧眼而不愿接受, 且不能治疗双侧角膜缺损;异体角膜移植来源匮乏,还存在免疫排斥反应,限制了此技术的广泛应用。采用组织工程技术再造角膜修复角膜缺损,为解决这一临床难题开辟了崭新的治疗途径。本文探讨以脱细胞角膜基质作为支架材料、以骨髓间充质干细胞作为种子细胞复合构建组织工程化人工活性角膜的可行性。方法①取兔新鲜角膜,先后浸入0.125%胰蛋白酶和0.01%乙二胺四乙酸混合溶液、1%曲拉通 X-100溶液中进行脱细胞处理,制备成脱细胞角膜基质,进行常规组织学 HE 染色观察;②采用密度梯度离心结合贴壁法分离纯化人骨髓间充质干细胞,用含10ng/mL 表皮生长因子的 Dulbecco 最低必需培养基进行诱导培养;③将经诱导培养的骨髓间充质干细胞种植于脱细胞角膜基质上,复合构建组织工程化人工活性角膜,观察细胞与材料的粘附、细胞增殖情况。结果①制备的脱细胞角膜基质主要由胶原纤维组成,未见细胞成分残留;②经表皮生长因子诱导培养的人骨髓间充质干细胞体外增殖良好,种植于脱细胞角膜基质上可生长增殖。结论以骨髓间充质干细胞作为种子细胞复合脱细胞角膜基质支架材料可成功构建组织工程化人工活性角膜,有望成为一种修复角膜缺损的新技术方法。对其结构、功能、理化性能及细胞定向分化条件的进一步研究是本项工作下一步的努力方向。

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