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《第八届全国烧伤外科学年会论文汇编》2007年
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不同发育阶段人表皮干细胞端粒酶表达的比较研究

刘德伍  黄培信  毛远桂  陈剑平  蓝蔚  王联群  
【摘要】:目的对比观察体外培养的人胎儿期、少儿期、成年期表皮干细胞端粒酶表达特征, 为表皮干细胞在皮肤组织工程中的应用奠定实验基础。方法分别取流产所获胎儿期、烧伤整形植皮术所获少儿期和成年期全层皮肤,用胰蛋白酶和 EDTA 联合消化法分离表皮,胶原快速贴附法分离纯化人表皮干细胞,以含表皮生长因子、角质细胞无血清培养液组成的表皮干细胞培养液行体外培养,通过β_1整合素、角蛋白19、p63等免疫细胞化学染色、细胞克隆形成率测定,对培养细胞进行鉴定。以免疫细胞化学染色法和图像分析法检测体外培养的胎儿皮肤、少儿皮肤和成年人表皮干细胞端粒酶表达。结果分离培养的人表皮干细胞呈明显克隆性生长,免疫细胞化学染色显示人表皮干细胞β_1整合素、K19和 p63呈阳性表达。分离培养的人胎儿皮肤来源表皮干细胞、少儿皮肤来源表皮干细胞、成人皮肤来源表皮干细胞端粒酶表达均呈阳性。但表达程度不同,其表达强弱依次人胎儿皮肤来源表皮干细胞、少儿皮肤来源表皮干细胞、成人皮肤来源表皮干细胞。图像分析法检测各组细胞平均吸光度值和阳性面积值,胎儿组、少儿组、成人组表皮干细胞平均吸光度值和阳性面积值均随年龄增加而逐渐降低,组间差异有显著性意义(P0.05)。结论人胎儿期、少儿期、成年期表皮干细胞均有端粒酶表达,但表达程度有不同,其表达强弱依次为人胎儿来源表皮干细胞、少儿来源表皮干细胞、成年期来源表皮干细胞。提示诱导和增加端粒酶活性对维持表皮干细胞自我更新和增殖能力可能具有重要意义。
【作者单位】:南昌大学第一附属医院烧伤中心 河南科技大学附属医院
【分类号】:R329.2

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