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《动物学专辑——上海市动物学会2001年年会论文集》2001年
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基因剔除小鼠制作过程中相关技术的建立

邹洪  马伟  丁澄  金玫蕾  
【摘要】:对小鼠基因剔除过程中所涉及的小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的培养、电转和阳性克隆的筛选、小鼠超数排卵等步骤的技术关键研究的结果,表明ES细胞发育全能性的保持是基因剔除小鼠制作成功的前提条件,而采用饲养层细胞培养ES 细胞是维持细胞的未分化状态,保持ES细胞发育全能性最为有效而经济的方法.采用电穿孔法转染ES细胞,当电转条件为300V,250μF时,ES细胞存活率可以维持在60%左右,电转效率可达4.08×10-4.对于不同的小鼠品系需选择不同的超排条件,其中雌鼠的性成熟程度是影响超排效果的主要因素.对于CD1品系,选择处于性成熟前期、3~4周龄、体重18—20g的小鼠,超排效果最理想.

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