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《动物营养与饲料研究——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集》2006年
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不同理化条件对α-半乳糖苷酶活性的影响

冒高伟  冯定远  董泽敏  曹庆云  叶慧  
【摘要】:正本试验研究温度、pH值、金属离子、不同糖体、胃肠道消化酶在体外对α-半乳糖苷酶活性的影响。其中,温度因素设定10个水平,即20、35、40、50、55、60、65、70、75、80℃,以温度35℃的酶液反应作对照(100%)。pH值因素设定12个水平,即2.5、3.0、4.0、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、8.0、9.0、 10.0、10.5,以pH值4.0的酶液反应作对照。Ca2+的浓度梯度设定3个水平,即0.5、1、2、4mmol/L, 而Fe2+、Mn2+、Zn2+、Mg2+、Cu2+浓度梯度设定4个水平,即5、10、20、40μmol/L,以不加离子的酶液反应作对照。葡萄糖、蔗糖、D-果糖和D-半乳糖浓度梯度设4个水平,即10、20、40、80mmol/L, 以不加糖体的酶液反应作对照。胃蛋白酶浓度梯度设定4个水平,即12.5、25、50、100U/ml,胰蛋白酶浓度梯度设定4个水平,即1.25、2.5、5、10U/ml,以不加胃肠道消化酶的酶液反应作对照。试验结果显示:(1)20~35℃时α-半乳糖苷酶活性急剧上升,至35℃时酶活力最高:35~40℃时酶活迅速下降,减少60%左右,至40℃、50℃和55℃时,酶活分别下降到其最佳酶活的39.1%、21.7%和15.5%; 60℃以上时,酶活几乎全部失活。(2)pH值2.5和6.0时的相对酶活分别为53.6%和73.5%,而其他pH 值时都保持在80%以上;pH值4.0~5.5时保持最佳酶活,且pH值4.0时达到最高;pH值7.0~10.5 时相对酶活达80%~95%。(3)Ca2+增强α-半乳糖苷酶的酶活;而Cu2+、Zn2+和Mg2+抑制α-半乳糖苷酶活性,其中Cu2+和Zn2+在浓度10μmol/L时表现为对酶活最大的抑制(P0.05);Mn2+除了在20μmol/L, 时保持原酶活不变,在其余3个浓度时都抑制该酶的酶活;5、10μmol/L的Fe2+对α-半乳糖苷酶的酶活有增强作用(P0.05),而在高浓度20、40μmol/L时则表现出对酶活的抑制作用(P0.05);(4)蔗糖和α-半乳糖在所有的浓度都表现出对α-半乳糖苷酶的酶活有不同程度的促进作用,其中40mmol/L浓度下有显著效果(P0.05);10、80mmol/L的α-半乳糖对α-半乳糖苷酶活性有很强的促进作用(P0.05), 而20、40mmol/L的α-半乳糖所表现出的酶活促进作用很是微弱(P0.05);葡萄糖在低浓度时表现出对酶活有促进作用,10mmol/L时达到显著水平(P0.05),而40、80mmol/L时它则表现出很强的抑制作用(P0.05):除20mmol/L果糖对α-半乳糖苷酶活性具有显著的促进作用外(P0.05),其他浓度条件下没有明显效果。(5)除了12.5 U/mL的胃蛋白酶表现出略有抑制α-半乳糖苷酶活性的作用外 (P0.05),其余各浓度都明显促进其活性(P0.05);与胃蛋白酶的作用相反,胰蛋白在所有的浓度都表现出对α-半乳糖苷酶的酶活有很强的抑制作用(P0.05),剩余酶活都在50%~65%之间。上述试验结果说明,啤酒酵母来源的α-半乳糖苷酶最适温度和pH值为35℃和4.0,Mg2+、Mn2+、Cu2+和Zn2+抑制酶活,Ca2+促进酶活,4种糖体共存时抑制酶活,胃蛋白酶促进酶活,而胰蛋白酶则抑制酶活。

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