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《山东生物化学与分子生物学会2009年学术会议论文汇编》2009年
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人类睾丸分泌精子结合蛋白HEL-S61的生物学研究

刘娟  王海燕  刘新  李宁  刘芙君  刘杰  王文亭  靳韶华  李建远  
【摘要】:目的进行人类睾丸分泌精子结合蛋白HEL-S61的生物学研究,了解其在男性生殖生理中的分子机制,为其异常所引起的男性不育症的诊断和治疗以及男性避孕药物的研发提供理论基础。方法通过对本室构建的人类附睾cDNA文库进行筛选,获得HEL-S61基因,通过生物信息学预测其结构和功能。合成多肽制备抗体,利用系统生物技术鉴定其在人类各组织中的表达特征及其在精子上的定位。利用HEL-S61抗体封闭人精子后测试精子各项功能变化,探索其在精子运动和受精等方面的潜在功能。结果经生物信息学分析HEL-S61与腺苷酸激酶AK1同源性100%。RT-PCR显示HEL-S61主要在人类睾丸和附睾中表达,免疫组化和Western-Blot显示HEL-S61是在人睾丸中表达,分泌到附睾管腔液中,特异结合在人精子尾部中段区域。精子在获能前后经抗体封闭后,精子活率及向前运动精子比例均受到影响。结论从人类附睾cDNA文库克隆筛选出HEL-S61基因,该蛋白为人类睾丸分泌精子结合蛋白,主要在精子运动及受精等方面发挥着重要作用。

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