收藏本站
《2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集》2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

五步蛇毒亲和纯化丝氨酸蛋白酶

辛瑜  董德贤  李荣秀  
【摘要】:本实验建立了一种在工业规模上从五步蛇毒纯化丝氨酸蛋白酶的方法.作为亲和配体,L-精氨酸被合成到介质上,并且由 ESI-MS 分析确定其结构.在整个纯化过程中,主要的亲和层析步骤可以去除95%以上的其他蛋白,在接下去的 DEAE 离子交换层析精制过程中,其他的微量蛋白被去除.这个蛋白的纯度在 HPLC Vydac C4柱分析中达到100%,在 G3000SW 柱分析中达到99.4%,在 SDS-PAGE 分析中达到99.7%.从粗蛇毒开始的蛋白回收率达到3.6%;纯化所得丝氨酸蛋白酶的纤维蛋白原凝结活性以及精氨酸酯酶活性的回收率分别达到82.2%和84%,高于其他文献的报道.此外,该蛋白酶也表现出精氨酸酰酶活性,在还原性 SDS-PAGE 分析中该蛋白的表观分子量在~40Kd.纯化所得蛋白酶在和亲和介质的吸附实验中,解离常数 Kd 和理论最大吸附量 Qmax 分别为9.93*10~(-5)mg/g 介质和38.1mg/g 介质.

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 程立均;马翠卿;杨建岭;魏敬双;张世雄;刘俊乐;魏林;贾茜;;重组单抗药物亲和层析病毒去除工艺验证[J];中国生物制品学杂志;2011年07期
2 侯爵;刘颖;邵一鸣;;黄热病毒的基因组及其蛋白研究进展[J];病毒学报;2011年04期
3 杨秀玲;姜秋;;组织蛋白酶K在口腔疾病中的研究进展[J];口腔医学研究;2011年09期
4 丁存宝;刘海燕;李桂秋;吴尚卓;贾长虹;;HCV NS3/4A蛋白酶抑制剂细胞筛选模型[J];生命的化学;2011年04期
5 徐宗全;刘恩宇;彭程;牛卫博;李允光;徐克森;牛军;;丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2在肝癌细胞系中的表达及其促凋亡作用[J];中国现代普通外科进展;2011年08期
6 栾晓玲;王艳;冯希平;;唾液链球菌尿素酶结构亚基的克隆和表达[J];口腔医学研究;2011年07期
7 祝程诚;李宝钏;吕志跃;吴忠道;;虫源性蛋白酶在寄生虫感染与免疫作用的研究进展[J];热带医学杂志;2011年05期
8 杨明;王丽萍;茅淑砚;吕静静;蒲春雪;王悦增;;激光显微切割技术在甲基化水平检测中的应用[J];中国实验诊断学;2011年08期
9 刘春丽;郭正义;司红卫;;脂肪因子chemerin的研究进展[J];泰山医学院学报;2011年04期
10 宋晶淼;;MMP-2与宫颈癌[J];中国伤残医学;2011年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 辛瑜;董德贤;李荣秀;;五步蛇毒亲和纯化丝氨酸蛋白酶[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
2 刘碧朗;梁九波;况前;何宁佳;;家蚕酚氧化酶原激活系统主要成分的生物信息分析[A];中国蚕学会第六届家蚕和柞蚕遗传育种学术研讨会论文集[C];2009年
3 汪斌;吴文平;刘杏忠;李世东;;被毛孢OWVT-1丝氨酸蛋白酶HR的分离纯化、性质研究及cDNA克隆[A];中国菌物学会第三届会员代表大会暨全国第六届菌物学学术讨论会论文集[C];2003年
4 邹成钢;屠惠慧;张克勤;;PacC基因调控粉红螺旋聚孢霉胞外丝氨酸蛋白酶基因PrC的表达[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
5 金扬;吕秋敏;魏继福;李东升;王婉瑜;熊郁良;;菜花烙铁头蛇毒丝氨酸蛋白酶的基因克隆、序列分析及三级结构模拟[A];中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会第4次、中国生物化学与分子生物学会毒素专业组第5次学术研讨会论文摘要[C];2001年
6 徐文岳;黄复生;张敬如;段建华;;大劣按蚊丝氨酸蛋白酶部分cDNA克隆与序列测定[A];中国动物学会第八次全国寄生虫学学术讨论会论文摘要汇编[C];2001年
7 朱中良;滕脉坤;牛立文;;尖吻蝮蛇毒丝氨酸蛋白酶(AE-A,AE-B)的分离纯化、结晶及结构解析[A];中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会第4次、中国生物化学与分子生物学会毒素专业组第5次学术研讨会论文摘要[C];2001年
8 王利民;秦贵信;;三种亲和层析体系纯化大豆凝集素的比较研究[A];动物营养与饲料研究——第五届全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2006年
9 李荣秀;Christopher R.Lowe;;人工蛋白A的结构优化(英文)[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
10 金俊琰;周莉;赵久刚;桂建芳;;石斑鱼防御素BD2基因在毕赤酵母中的分泌表达及纯化[A];湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 熊燕;中科院昆明动物研究所揭示蚊子吸血特性[N];云南日报;2009年
2 白毅;保证血液制品的安全性[N];中国医药报;2003年
3 本报记者 陈敬农 通讯员 汪灶标;不竭的动力[N];科技日报;2001年
4 邱家山 方为茂;人凝血酶原复合物分离纯化技术推陈出新[N];中国医药报;2006年
5 本报特约撰稿人 陆志城 樊凤辉;NS3蛋白酶抑制剂挑战HCV[N];医药经济报;2003年
6 ;冠心病又有好药治了[N];中国中医药报;2000年
7 冯瑶;急性脑出血可用中医药治[N];健康报;2005年
8 通讯员 冯瑶;中医中药可干预治疗急性脑出血[N];家庭医生报;2004年
9 陆志城;2001年批准上市的新分子实体药物[N];医药经济报;2002年
10 青锋;应用抑肽酶须防副作用[N];医药经济报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 史影;新型丝氨酸蛋白酶SNC19生物学特性及肿瘤转移功能的研究[D];浙江大学;2004年
2 胡晓晔;一种新的丝氨酸蛋白酶——SNC19(ST14)基因编码蛋白的生物特性的研究[D];浙江大学;2002年
3 王昭;N-V蛋白酶的溶栓机理及酶学特点研究[D];吉林大学;2006年
4 刘丽华;稻瘟病菌几丁质酶和丝氨酸蛋白酶之水稻受体研究[D];福建农林大学;2009年
5 刘振桐;结核分枝杆菌H37Rv分泌滤液中糖蛋白的筛选[D];大连医科大学;2007年
6 张卫卫;弧菌琼胶酶和丝氨酸蛋白酶的筛选、分析以及免疫应用[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2009年
7 赵喜亭;失水胁迫对月季切花花瓣内肽酶种类及其活性的影响[D];中国农业大学;2005年
8 朱玲;扇贝丝氨酸蛋白酶及其抑制剂基因的克隆与表达[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2006年
9 沈元月;脱落酸(ABA)结合蛋白基因克隆、表达及其产物对ABA的特异结合[D];中国农业大学;2003年
10 许建强;基因重组大连蛇岛蝮蛇类凝血酶的制备与性质表征[D];大连理工大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈阶;斑蝥素提取、特异性抗体的制备及其酶联免疫检测方法的研究[D];重庆大学;2008年
2 刘杰;vMIP-Ⅱ在大肠杆菌表达、纯化的条件优化及活性鉴定[D];暨南大学;2003年
3 张立;新型β-琼胶酶工程菌株的构建、重组表达及体外复性的研究[D];中国海洋大学;2006年
4 曹新影;多孔二氧化硅空心微球的制备及其在生物亲和层析中的应用[D];汕头大学;2007年
5 高晓鹏;结核分枝杆菌Rv1884c和Rv0867c基因的克隆表达及其促生长作用的研究[D];第四军医大学;2007年
6 杨卓刚;嗜热菌Thermus thermophiles HB8丙酮酸脱氢酶的表达及其酶动力学测定[D];首都师范大学;2008年
7 宋晓彤;重组肠激酶包涵体的复性、纯化及其新型重组子的构建[D];天津大学;2008年
8 罗臻;在重组大肠杆菌和盘基网柄菌中高效表达可溶性人类Fas配体[D];厦门大学;2009年
9 蒋昌龙;胃癌相关S100P的基因克隆、原核表达及其多克隆抗体的制备[D];华东师范大学;2005年
10 黄鹏;链酶亲和素纯化鉴定与链霉菌L-183发酵条件优化[D];河北医科大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026