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《中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集》2005年
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利用Penicillium sp.Li-3菌株生物合成β-D-单葡萄糖苷酸基草次酸产酶特性的研究

李春  冯世江  王小艳  
【摘要】:甘草酸(glycyrrhizin,GL)是一种重要的天然甜味剂和药物,但对人体有一定副作用。甘草酸经生物改性后的制品β-D-单葡糖苷酸基甘草次酸(Glycyrrhetinic acid monoglucuronide,GAMG)的甜度提高了5倍多,是蔗糖的1000多倍,并且GAMG 的LD50为5000mg/kg,远远大于甘草酸的LD的805mg/kg,比甘草酸更加安全。此外,GAMG 作为药物除了具有和甘草酸同样的抗炎症、抗病毒等疗效外,在体内比甘草酸具有更好的生物利用度;因而极有望成为甘草酸类药物更有效的替代品。本实验室选育的Penicillium sp.Li-3菌株经甘草酸诱导后,表达的葡糖酸苷酶具有较高底物特异性, 能定向水解甘草酸后生成β-D-单葡糖苷酸基甘草次酸。本文对该菌株的产酶特性包括培养基组分和培养条件进行了研究。结果表明,在培养基组分方面:该菌株所产的甘草酸水解酶是诱导酶,存在着碳代谢阻遏现象,甘草酸是最佳碳源及诱导剂,最佳氮源为无机氮源NH4NO3,培养基的最佳初始pH范围为4.8—5.1,添加表面活性剂(Tween80) 1‰能显著提高酶活;在培养条件方面:最适产酶培养温度为30℃,摇床转速为180r/min,最佳接种量为5%,培养2天后补加碳源能显著提高酶活,最佳培养时间为4天。在上述条件下,最高酶活可达286.13U/ml。

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