乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1截短突变体的原核表达及其免疫保护力分析
【摘要】:乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1具备免疫原性,且可诱导免疫保护力。但是,全长NS1蛋白在大肠杆菌中表达量不高。为了获得在大肠杆菌中稳定高效表达的NS1抗原,本研究构建删除NS1蛋白C端两个强疏水区的截短突变体NS1_(△63)的重组表达载体pET28a-NS1_(△63),转化大肠杆菌,IPTG诱导。SDS-PAGE和Western blotting分析表明NS1_(△63)在大肠杆菌中能够高效且稳定表达。Ni柱纯化NS1_(△63),免疫BALB/c小鼠2次,3周后,ELISA检测NS1抗血清效价达到1:12150。免疫小鼠的保护力试验表明NS1_(△63)有保护活性。因此,本研究制备的NS1_(△63)蛋白有较好的临床应用前景。
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