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《西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集》2000年
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石防风原生质体遗传转化及抗除草剂植株的再生

王秀凤  杨爱芳  张举仁  
【摘要】:正以石防风[Peucedanum terebinthaceum(Fisch)Fisch.exTurcz.]叶柄愈伤组织为材料,建立以致密细胞团为主的悬浮培养物,用酶解法获得原生质体.用PEG法将拟南芥菜[Arabidopsis thaliana(L.)Heyynh]抗除草剂基因(als)导入原生质体后进行液体浅层培养.转化细胞经除草剂chlorsulfu-ron筛选,通过胚状体途径产生抗性小植株.转化处理10~6个原生质体,以加入40~50μg/ml质粒DNA、PEG终浓度为10%,于1ml转化介质中26℃黑暗下处理20分钟的效果最好.ctDNA的加入对转化结果无明显影响.分子杂交试验表明,突变的als基因已整合进转化植株的基因组中.转基因植株的细胞在脱分化过程中仍表现出抗除草剂特性,而未转化的植株在低浓度除草剂下即逐渐死亡.表明转入的als基因在石防风细胞内能够稳定表达.
【作者单位】:山东省东营市环保科研所
【分类号】:Q943

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