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《中国生理学会生殖科学专业委员会—中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会暨“生殖科学专业委员会第二次学术交流会”和“生殖生物学分会第十六次学术年会”论文集》2017年
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OPN调控骨破坏相关CathepsinK及MMP9表达及信号通路分析

董明  于新新  刘超  关莹  隋琳琳  孔英  
【摘要】:根尖周炎是口腔中的病原刺激物引起的细菌感染性进行性疾病,其慢性期的主要表现为根尖区牙骨质和牙槽骨发生不同程度的吸收,被炎症性肉芽组织所取代。机体组织细胞受到致病菌的侵袭后,将引发一系列炎症反应。免疫炎症反应长期持续性作用于机体,会引发骨代谢相关信号传导通路的变化,使骨改建的平衡失调,造成根尖周软硬组织的损伤和丧失。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是由成及破骨细胞分泌的一种高度磷酸化的糖蛋白,可以沉积到骨基质中促进破骨细胞黏附或者类骨质矿化,主要作为非胶原性的细胞外基质蛋白分布在矿物组织中。本研究选取MC3T3-E1(前成骨细胞)及RAW264.7(前破骨细胞),分为空白对照组及NF-KB抑制剂组每组再分为Mock亚组、OPN-siRNA亚组、Over-OPN亚组,采用免疫荧光技术检测各组NF-KB核内外的表达情况:采用Western blot检测骨破坏经典标志物CathepsinK及MMP9的蛋白表达情况;采用RT-PCR检测肿瘤经典标志物CathepsinK及MMP9的基因表达情况;采用CCK8实验及ALP验检测OPN是否是通过NF-kb信号通路调控不同成骨细胞及破骨细胞的增殖、分化能力。结果:OPN可上调成骨及破骨细胞中骨破坏经典因子的表达。OPN可加速成骨及破骨细胞NF-kb核内移,上调NF-kb的表达。OPN激活NF-kb信号通路,上调CathepsinK及MMP9蛋白及基因的表达。OPN激活NF-kb信号通路调控成骨细胞破骨及细胞的增殖、分化能力。

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