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《中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集》2010年
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吸入NO促进骨髓EPC动员在幼猪急性肺损伤修复中的作用及其机制

祁媛媛  钱莉玲  孙波  
【摘要】:目的:探讨吸入NO对严重肺损伤幼猪骨髓EPC的动员作用、机制及对肺损伤修复的影响。方法:健康幼猪(7~10 kg)24头,分为4组(n=6):C组:单纯机械通气;M组:油酸(0.13~0.15 mL/kg)诱导严重肺损伤+机械通气;GM组:M+G-CSF(10μg/kg per day);NM组:M+10 ppm NO。分别在基础(B)、成模(0 h)、24 h、72 h、168 h,免疫荧光-流式细胞术测外周血、骨髓EPC水平;测血浆动员因子、髓NO含量、MMP-9活性;荧光定量实时PCR测肺组织VEGF、VEGFR2 mRNA表达,免疫组化测VEGFR2、eNOS、FactorⅧ表达,TUNEL法测细胞凋亡,并行肺组织形态学检查、肺损伤评分。结果:(1)循环EPC:GM组168 hCD133~+及CD34~+KDR~+细胞数,NM组24h、168 hCD34~+KDR~+及KDR~+CD133~+细胞数明显高于M和C组。(2)骨髓EPC:M组24 h各组合细胞比例均较基础值升高;GM和NM组24 h各标记组合细胞比例均较M组有下降趋势。(3)吸入NO促进EPC动员的机制:a.血浆动员因子。NM组72 h血SDF-1和VEGF均高于M和C组,SDF-1与CD34~+KDR~+CD133~+及KDR~+CD133~+细胞数呈正相关。b.骨髓相关动员介质。24 h M组的骨髓NO低于C组;NM组骨髓NO在72 h明显高于M和GM组。M组24 h、72 h骨髓MMP-9含量低于基础值;NM组72h MMP-9升高。(4)肺损伤修复指标:NM组24 h血管外肺水指数、NM和GM组肺血管通透性指数和肺通透性指数均较M组显著改善,NM组肺组织VEGF、VEGFR2mRNA表达及VEGFR2的免疫组化染色均高于M和C组,eNOS染色也高于M组,肺组织血管密度明显高于M组,细胞凋亡明显少于M组,病理损伤较M组明显减轻,肺损伤评分炎性细胞浸润、水肿、小气道损伤均明显低于M组。结论:吸入NO可升高血浆SDF-1和VEGF水平,提高骨髓NO及MMP-9含量,促进骨髓EPC动员至外周血,促进肺损伤修复。
【作者单位】:复旦大学附属儿科医院
【基金】:国家自然科学基金(No.30600687)资助
【分类号】:R363

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