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《2009年中国水产学会学术年会论文摘要集》2009年
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一株草鱼呼肠孤病毒的分离与鉴定

王庆  张超  石存斌  吴淑勤  
【摘要】:从浙江省湖州市采集草鱼样品共12份,处理后接种草鱼肾脏细胞(CIK),从中分离到一株病毒(HZ08)。该病毒接种细胞后,未出现明显病变。盲传三代后收集感染细胞,经电镜观察发现细胞中有大量病毒颗粒,病毒无囊膜,有双层衣壳,呈正廿面体对称,大小约70nm。琼脂糖凝胶电泳显示,病毒基因组分节段,将病毒提纯后分别经DNA酶,RNA酶和绿豆核酸酶消化,证实为双链RNA病毒,推测由11个dsRNA组成。为了进一步从分子水平上证实该病毒是呼肠孤病毒,我们对其基因组的第6个片段(S6)进行了全长克隆,测序结果表明,S6由2031个核苷酸组成,编码一个分子量约为68.4Kda的蛋白。在氨基酸水平上与草鱼呼肠孤病毒873株、美国草鱼呼肠孤病毒、鲅呼肠孤病毒和水生呼肠孤病毒A的同源性分别为33%、30%、31%和31%。利用氨基酸序列构建系统进化树,HZ08与水生呼肠孤病毒聚为一类。从实验结果推测,该病毒可能为水生呼肠孤病属新成员。

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