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《中国水产学会第五届青年学术年会摘要集》2004年
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白斑综合症病毒与宿主细胞的识别机制

黄倢  
【摘要】:WSSV与对虾细胞存在特异性粘附作用,这种粘附作用可通过DIG或荧光素标记的病毒结合及结合抑制分析技术得到验证。通过结合动力学分析说明,WSSV与对虾细胞膜的结合常数为1.84×10~(10)。能被WSSV感染的对虾各种组织细胞均具有与WSSV粘附的活性,而不能被WSSV感染的各种组织不具有与WSSV粘附的活性;多种甲壳类宿主组织细胞膜蛋白所具有的与WSSV粘附的活性,并且这种粘附活性能与对虾细胞膜的粘附活性发生竞争性作用,与WSSV感染的广泛宿主范围相符。可阻断WSSV与对虾细胞膜蛋白的粘附作用的物质对WSSV的感染也具有抑制作用。WSSV与细胞有粘附作用有4种结构蛋白参与,包括2种中低分子量蛋白(VAP1、YAP2)和2种高分子量蛋白(YAP3、VAP4)。通过MALDI-TOF技术确定了1种中低分子量和1种高分子量VAP的基因,表达的VAP1具有与对虾鳃细胞膜蛋白有强烈的结合活性,并能抑制WSSV与对虾细胞膜蛋白的结合。通过离子交换层析和凝胶过滤层析的对虾细胞膜蛋白活性组分的分离技术和以及结合活性分析技术,锁定一个可能的对虾鳃细胞膜受体蛋白。采用标记的病毒或细胞膜蛋白对包被的细胞膜蛋白或病毒进行结合分析是一种简便、快捷、灵敏的病毒与宿主成分相互作用分析技术,采用这一技术,筛选到了对WSSV和对虾细胞膜蛋白结合具有阻断作用的三种多糖或多糖结合蛋白类物质,这一技术为抗病毒药物筛选提供一条快捷的技术途径。

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